文献类型：期刊文章

作　　者：蔡恩平[1] 梅丹[1] 张小萌[1] 孙贤[1,2] 李玲玉[1,2] 吴熔熔[1] 邓懿祯[1,2] 姜子德[1] 常长青[1,2]

CAI En-Ping;MEI Dan;ZHANG Xiao-Meng;SUN Xian;LI Ling-Yu;WU Rong-Rong;DENG Yi-Zhen;JIANG Zi-De;CHANG Chang-Qing(College of Plant Protection,South China Agricultural University,Guangzhou,Guangdong 510642,China;Integrate Microbiology Research Center,Guangdong Province Key Laboratory of Microbial Signals and Disease Control,South China Agricultural University,Guangzhou,Guangdong 510642,China)

机构地区：[1]华南农业大学植物保护学院,广东广州510642 [2]华南农业大学群体微生物研究中心广东省微生物信号与病害防控重点实验室,广东广州510642

出　　处：《菌物学报》

基　　金：国家自然科学基金面上项目(31672091)。

年　　份：2020

卷　　号：39

期　　号：12

起止页码：2314-2327

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：由甘蔗鞭孢堆黑粉菌Sporisoriumscitamineum引起的甘蔗黑穗病是甘蔗生产的主要病害,严重影响了甘蔗的产量和品质,然而其分子致病机制报道很少,极大地影响了有效防控技术的开发。为了提高该病菌基因功能的研究效率,本研究以甘蔗鞭孢堆黑粉菌有性配合两个关键基因SsGPA3和SsPRF1为目标,建立了基于DNA双片段的甘蔗鞭孢堆黑粉菌原生质体转化基因敲除技术体系。结果表明甘蔗鞭孢堆黑粉菌单倍体细胞生长期在OD600约为0.7,28℃下10mg/mL细胞壁裂解酶作用30min获得的原生质体产率最高,再生率最优;使用线性DNA双片段转化获得阳性转化子的成功率达90%以上,显著高于线性DNA单片段和质粒。本方法的建立将极大地提高甘蔗鞭孢堆黑粉菌的基因敲除效率,同时也为其他真菌的基因敲除提供借鉴。

关 键 词：甘蔗鞭孢堆黑粉菌  原生质体 基因敲除 同源重组

分 类 号：S435.661]