文献类型：期刊文章

作　　者：康超[1] 荣娜[1] 简思杰[1] 孙薇[1] 刘祥[1] 陈琛[1] 陈春琳[1]

KANG Chao;RONG Na;JIAN Sijie;SUN Wei;LIU Xiang;CHEN Chen;CHEN Chunlin(Chinese-German Joint Institute for Naturel Product Research,College of Biological Sciences and Engineering,Shaanxi University of Technology,Hanzhong 723001,China)

机构地区：[1]陕西理工大学生物科学与工程学院,中德天然产物研究所,陕西汉中723001

出　　处：《河南农业大学学报》

基　　金：国家外国专家局项目(GDT20186100426);陕西省科技厅重点研发计划项目(2020LSFP2-38);陕西理工大学人才项目(SLGQD1803)。

年　　份：2021

卷　　号：55

期　　号：1

起止页码：80-88

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2021_2022、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：为嗜水气单胞菌外膜蛋白AH6169亚单位疫苗的研究奠定理论基础,采用生物信息学方法分析了AH6169的理化性质、结构与功能;分子克隆构建AH6169表达菌株,正交试验筛选其最佳诱导表达条件;通过包涵体洗涤和SDS-PAGE电泳切胶纯化AH6169蛋白;小鼠免疫蛋白制备多克隆抗血清;Western blotting鉴定抗血清特异性与效价;酶联免疫法体外模拟AH6169抗血清与重要水产病原菌的相互识别作用。结果表明,AH6169属跨膜蛋白,无规则卷曲占全序列46.79%,延伸25.49%,α-螺旋22.69%;不同种类的气单胞菌AH6169蛋白保守性较高;成功构建AH6169表达菌株,最佳表达条件为诱导时菌液浓度OD600=0.8,IPTG浓度0.1 mmol·L^(-1),32℃诱导8 h;纯化获得AH6169蛋白,制备的AH6169小鼠抗血清具有较好的特异性,且效价达到1∶1 600;AH6169蛋白抗血清与嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌和溶藻弧菌存在相互识别作用。说明AH6169蛋白有较好的抗原性,AH6169可为不同种类的气单胞菌提供交叉免疫保护作用,并且其细胞表位较为丰富,可能是一种潜在的疫苗候选成分。

关 键 词：嗜水气单胞菌 外膜蛋白AH6169  多克隆抗血清  抗原性

分 类 号：Q71]