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基于第三代纳米孔测序技术的东方蜜蜂微孢子虫全长转录组构建及注释
Construction and annotation of the full-length transcriptome of Nosema ceranae based on the third-generation nanopore sequencing technology
文献类型:期刊文章
CHEN Hua-Zhi;DU Yu;FAN Xiao-Xue;ZHU Zhi-Wei;JIANG Hai-Bin;WANG Jie;FAN Yuan-Chan;XIONG Cui-Ling;ZHENG Yan-Zhen;FU Zhong-Min;XU Guo-Jun;CHEN Da-Fu;GUO Rui(College of Animal Sciences(College of Bee Science),Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China;Apitherapy Research Institute,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China)
机构地区:[1]福建农林大学动物科学学院(蜂学学院),福州350002 [2]福建农林大学蜂疗研究所,福州350002
基 金:国家现代农业产业技术体系建设专项资金项目(CARS-44-KXJ7);福建省自然科学基金项目(2018J05042);福建省教育厅中青年教师教育科研项目(JAT170158);福建农林大学杰出青年科研人才计划项目(xjq201814);福建农林大学科技创新专项基金项目(CXZX2017342,CXZX2017343);福建省大学生创新创业训练计划项目(3165602032,3155006018)。
年 份:2020
卷 号:63
期 号:12
起止页码:1461-1472
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:【目的】本研究旨在利用Oxford Nanopore测序技术组装和注释东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae的高质量全长转录组。【方法】采用Nanopore PromethION系统对东方蜜蜂微孢子虫的纯净孢子进行转录组测序。通过识别每条clean read两端引物鉴定全长转录本序列。利用Blast工具将全长转录本比对Nr,Swiss-Prot,KOG,eggNOG,Pfam,GO和KEGG数据库,获得相应注释信息。分别利用蛋白结构域分析方法CPC,CNCI,CPAT和Pfam对长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)进行预测,获得高可信度lncRNA。利用CPM(counts per million)法计算每一条全长转录本的表达量。【结果】利用Nanopore PromethION系统对东方蜜蜂微孢子虫转录组测序共测得6988795条raw reads,经质控获得6953469条clean reads,其中包含5143999条全长转录本。共鉴定到10243条非冗余全长转录本,N50和平均读长分别为1042 bp和894 bp,最大读长为4855 bp。有9342,4038,4283,2569,4859和3450条全长转录本分别注释到Nr,KOG,eggNOG,Pfam,GO和KEGG数据库。注释到东方蜜蜂微孢子虫、蜜蜂微孢子虫Nosema apis和家蚕微孢子虫Nosema bombycis的全长转录本数量最多。共鉴定到87条高可信度lncRNA,包含49条正义链lncRNA(sense lncRNA)、25条反义链lncRNA(anti-sense lncRNA)和13条基因间区lncRNA。本研究的测序量足以检测到全部表达的全长转录本,全长转录本的表达量(CPM)范围在0.1到10000以上。【结论】本研究构建和注释了东方蜜蜂微孢子虫的高质量全长转录组数据,可为病原的比较转录组分析、转录本的可变剪接和可变腺苷酸化分析、简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)位点挖掘、基因结构优化以及基因全长序列克隆及功能研究提供关键基础。
关 键 词:东方蜜蜂微孢子虫 全长转录组 长链非编码RNA 第三代测序技术 纳米孔测序
分 类 号:S895.3]
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引证文献:
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