文献类型：期刊文章

作　　者：滕蔓[1,2] 迟佳琦[3] 柴书军[1,2] 罗俊[1,2,4]

TENG Man;CHI Jiaqi;CHAI Shujun;LUO Jun(Key Laboratory of Animal Immunology,Ministry of Agriculture & Henan Provincial Key Laboratory of Animal Immunology,Henan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou 450002,China;UK-China Centre of Excellence for Research on Avian Diseases,Henan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou 450002,China;Dongfang Hospital,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing 100078,China;Key Laboratory of Animal Disease and Public Safety,College of Animal Science and Technology,Henan University of Science and Technology,Luoyang 471003,China)

机构地区：[1]河南省农业科学院农业部动物免疫学重点实验室/河南省动物免疫学重点实验室,河南郑州450002 [2]河南省农业科学院中英禽病国际研究中心,河南郑州450002 [3]北京中医药大学东方医院,北京100078 [4]河南科技大学动物科技学院/动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003

出　　处：《河南农业科学》

基　　金：国家自然科学基金项目(U1604232);中原英才计划-中原基础研究领军人才项目(2019—2020);河南省重点研发与推广专项(科技攻关)(192102110072);河南省农业科学院杰出青年科技基金项目(2019JQ01)。

年　　份：2020

卷　　号：49

期　　号：12

起止页码：144-150

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为了研究鸡潜在转化生长因子结合蛋白(LTBP1)功能,构建原核表达重组质粒pET-30a-LTBP1,转化E.coli BL21感受态细胞并经IPTG诱导进行表达。对以包涵体形式表达的LTBP1蛋白进行变复性和亲和层析纯化,然后免疫Balb/C小鼠,利用细胞融合技术建立单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备抗鸡LTBP1的单克隆抗体。通过间接酶联免疫吸附试验(iELISA)筛选,获得了2株杂交瘤细胞株3C11-A9和2B1-G7。以效价较高的3C11-A9制备单克隆抗体腹水,间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot)试验结果均表明,单克隆抗体3C11-A9可特异性识别鸡源细胞CEF和DF-1表达的LTBP1蛋白,同时IFA结果还显示,3C11-A9单克隆抗体腹水可与包括人、猴、猪和鼠在内的8种常见哺乳动物细胞发生特异性染色。综上,成功制备了抗鸡LTBP1单克隆抗体,且具有多物种广谱识别特性。

关 键 词：鸡  LTBP1  原核表达 单克隆抗体 间接免疫荧光试验 蛋白免疫印迹试验  

分 类 号：S855.3]