文献类型：期刊文章

作　　者：许梦怡[1,3] 王彦红[1,2] 薛峰[4]

XU Meng-yi;WANG Yan-hong;XUE Fen(College of Veterinary Medicine,Yangzhou University,Yangzhou 225009,China;Huaian Higher Vocational School of Biological Engineering,Jiangsu Province,Yangzhou 225009,China;Jiangsu Co-Innovation Center for Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses,Jiangsu Province,Huaian 223200,China;College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China)

机构地区：[1]扬州大学兽医学院,江苏扬州225009 [2]江苏省淮安生物工程高等职业学校,江苏扬州225009 [3]江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏淮安223200 [4]南京农业大学动物医学院,江苏南京210095

出　　处：《中国兽医科学》

基　　金：江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD);江苏高校品牌专业建设工程资助项目(PPZY2015B158);国家重点研发计划项目(2017YFF0208600)。

年　　份：2020

卷　　号：50

期　　号：12

起止页码：1500-1508

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2019_2020、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：根据TGEV的M基因、PEDV的M基因和PoRV的VP2基因序列,通过优化引物、探针浓度和退火温度,确定了最佳的反应体系和扩增程序,成功建立了这3种病毒的TaqMan探针单重荧光定量PCR方法。在此基础上,经过进一步的条件优化,建立了检测TGEV、PEDV、PoRV的三重实时荧光定量PCR方法,该方法对TGEV、PEDV、PoRV的检测灵敏度分别为2.49 copies/μL、4.36 copies/μL、4.96 copies/μL,TGEV、PEDV、PoRV的组内重复试验的CV最大值分别为2.5%、3.8%、4.3%,组间重复性试验的CV最大值分别为3.7%、3.4%、3.2%,均不超过5%,表明建立的方法重复性好;用此方法对PRV、PCV1、PRRSV病毒样本进行检测,均没有交叉反应,表明该方法特异性好;用建立的方法对临床40份病料样品进行了检测,结果显示,TGEV、PEDV、PoRV的阳性检出率分别为5%、30%、12.5%;其中TGEV与PEDV混合感染率为2.5%;PEDV与PoRV混合感染率为5%;多重荧光定量PCR方法与单一荧光RT-PCR方法的检测结果均一致,表明建立的方法具有很好的临床应用价值。

关 键 词：猪传染性胃肠炎病毒 猪流行性腹泻病毒 猪轮状病毒 TaqMan荧光定量PCR  

分 类 号：S852.659.6] S852.659.4[动物医学类]