文献类型：期刊文章

作　　者：谢晋[1,2] 杨德强[1,3] 周峻岗[1,3] 李翊峰[4] 吕红[1,3]

XIE Jin;YANG Deqiang;ZHOU Jungang;LI Yifeng;LüHong(State Key Laboratory of Genetic Engineering, Fudan University, Shanghai 200438, China;WuXi Biologics Co., Ltd., Wuxi, Jiangsu 214092, China;Shanghai Engineering Research Center of Industrial Microorganisms, School of Life Sciences, Fudan University, Shanghai 200438, China;WuXi Biologics(Shanghai)Co.,Ltd.,Shanghai 200131,China)

机构地区：[1]复旦大学遗传工程国家重点实验室,上海200438 [2]无锡药明生物技术有限公司,江苏无锡214092 [3]复旦大学生命科学学院上海工业菌株工程技术研究中心,上海200438 [4]上海药明生物技术有限公司,上海200131

出　　处：《复旦学报（自然科学版）》

基　　金：上海市科学技术委员会项目(18391901800,19DZ2282100)。

年　　份：2020

卷　　号：59

期　　号：6

起止页码：685-694

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD_E2019_2020、JST、MR、RCCSE、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：猪圆环病毒(PCV)是一种引起断奶仔猪多系统衰竭综合征、呼吸道综合征及繁殖障碍的病毒,已经成为危害养猪业最主要的病原之一,而接种猪圆环病毒2型(PCV2)疫苗是控制猪圆环病毒相关疾病最有效的措施.利用马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus,KM)表达猪圆环病毒PCV2 Cap的产量可达2g/L,高于其他表达系统的产量,并且重组表达的Cap蛋白在胞内能高效自组装成病毒样颗粒(Virus-Like Particles,VLPs).酵母细胞破碎之后样品中含有大量的微小的细胞碎片,高速离心澄清难以分离,影响了VLPs的得率、纯度以及澄清度.本研究考察了超声波破碎、玻璃珠研磨破碎以及高压均质破碎等不同破碎方法,发现1300bar高压均质法对重组表达PCV Cap蛋白的马克斯克鲁维酵母破碎效果最佳.在此基础上,检测添加有机溶剂、表面活性剂和化学絮凝剂的处理效果,发现添加1%(质量分数)Triton X-100对酵母破碎菌液具有65%以上的浊度降低率,处理后样品可直接用于离子交换层析,得率大于92%,HPLC纯度大于85%.

关 键 词：马克斯克鲁维酵母 猪圆环病毒 病毒样颗粒 浊度 纯化

分 类 号：Q819[生物工程类]