文献类型：期刊文章

作　　者：孙天杰[1] 麻楠[1] 孙立永[2] 王梦璇[1] 孙希哲[1] 张洁[1] 王冬梅[1]

SUN Tian-Jie;MA Nan;SUN Li-Yong;WANG Meng-Xuan;SUN Xi-Zhe;ZHANG Jie;WANG Dong-Mei(State Key Laboratory of North China Crop Improvement and Regulation/Key Laboratory of Hebei Province for Plant Physiology and Molecular Pathology/College of Life Sciences,Hebei Agricultural University,Baoding 071001,China;Collaborative and Innovation Center of Hebei,Shijiazhuang 050000,China)

机构地区：[1]省部共建华北作物改良与调控国家重点实验室/河北农业大学生命科学学院/河北省植物生理与分子病理学重点实验室,保定071001 [2]河北省协同创新中心,石家庄050000

出　　处：《农业生物技术学报》

基　　金：国家自然科学基金(30971706,31471421);973计划前期研究专项课题(2014CB160318)。

年　　份：2020

卷　　号：28

期　　号：11

起止页码：2080-2090

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：病毒介导的基因沉默(virus-induced gene silencing,VIGS)是一种快速、高效、便捷的基因功能验证的反向遗传学手段。烟草脆裂病毒(Tobacco rattle virus,TRV)介导的VIGS技术可以在多种植物上实现基因沉默,但其应用却因由侵染操作引起的植物损伤与沉默效率低下受到限制。本研究以大豆(Glycine max)为材料,通过对农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)侵染方法进行改良,使TRV从植物根部侵染,随病毒在植物体内的运输,实现对植物内源基因的系统性沉默。实验结果表明,将携带VIGS载体的农杆菌使用本方法从根部侵染大豆后,可以使同一处理批次内近全部植株产生有效基因沉默,基因沉默效率均在67%以上,最高达到98%;对处理植株不同位置的叶片进行检测,发现第1至第3轮三出复叶均有较为理想的沉默效果,其中第1轮三出复叶的沉默效率最高;本研究有效沉默的基因包括非特异性脂质转运蛋白(non-specific lipid-transfer protein,LTP)、病程相关蛋白1(pathogenesis-related protein 1,PR1)、索马甜类蛋白(thaumatin-like protein,TLP)、脱水素类蛋白(dehydrin-like protein,DHN)、木葡聚糖内糖基转移酶(xyloglucan endotransglucosylase,XTH)和富半胱氨酸跨膜蛋白(cysteine-rich transmembrane protein,CYSTM)。本方法简单易行,可以在短时间内获得大量的基因沉默植株,为基因功能的验证建立了高效的实验操作体系。

关 键 词：病毒介导的基因沉默(VIGS)  烟草脆裂病毒 沉默效率  大豆 系统性沉默  

分 类 号：S184]