文献类型：期刊文章

作　　者：段懿桐[1] 李雪莹[1] 周峻岗[1,2] 余垚[1,2] 吕红[1,2]

DUAN Yitong;LI Xueying;ZHOU Jungang;YU Yao;Lü Hong(State Key Laboratory of Genetic Engineering,Fudan University,Shanghai 200438,China;Shanghai Engineering Research Center of Industrial Microorganisms,School of Life Sciences,Fudan University,Shanghai 200438,China)

机构地区：[1]复旦大学遗传工程国家重点实验室,上海200438 [2]复旦大学生命科学学院上海工业菌株工程技术研究中心,上海200438

出　　处：《复旦学报（自然科学版）》

基　　金：上海市科学技术委员会项目(19DZ2282100);国家科技部项目(2014AA021301)。

年　　份：2020

卷　　号：59

期　　号：5

起止页码：599-607

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD_E2019_2020、JST、MR、RCCSE、ZGKJHX、ZMATH、核心刊

摘　　要：木聚糖的降解需要内切β-木聚糖酶和β-D-木糖苷酶的协同作用,β-D-木糖苷酶能将β-木聚糖酶的水解产物木寡糖降解为木糖,因此在半纤维素的利用中具有重要的意义.本研究将中国牦牛瘤胃微生物来源的糖基水解酶GH43家族β-D-木糖苷酶基因RuXyn1克隆到含两种不同分泌信号肽(菊粉酶信号肽和α-factor信号肽)的马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus)分泌表达载体(pUKDN132和pUKDN129)中,转化K.marxianus Fim-1 ura3Δ,通过筛选获得两株分泌表达β-D-木糖苷酶基因RuXyn1的重组菌株Fim-1/pUKDN132-RuXyn1和Fim-1/pUKDN129-RuXyn1.重组菌株摇瓶培养72h后,上清液中β-D-木糖苷酶酶活分别为0.304U/mL和0.045U/mL.在5L发酵罐高密度发酵中,Fim-1/pUKDN132-RuXyn1分泌表达的β-D-木糖苷酶酶活为1.75U/mL,而Fim-1/pUKDN129-RuXyn1的酶活为1.6U/mL,表明在表达β-D-木糖苷酶RuXyn1时,菊粉酶信号肽介导的分泌效率优于α-factor信号肽.以玉米芯为底物,我们测试了K.marxianus重组表达的β-D-木糖苷酶RuXyn1的降解效果,发现在商业化的β-木聚糖酶和纤维素酶CTec2中,添加β-D-木糖苷酶RuXyn1能够显著提升玉米芯的降解效率,还原糖产量提高7%,木糖和葡萄糖的产量分别提高12.4%和6.1%.

关 键 词：木聚糖 β-D-木糖苷酶  表达载体  马克斯克鲁维酵母 重组表达  

分 类 号：Q36] Q814