文献类型：期刊文章

作　　者：吕喆[1] 蒋晓刚[2] 廉民学[3]

LV Zhe;JIANG Xiao-gang;LIAN Min-xue(Department of Surgery,Xi'an Daxing Hospital,Xi'an 710082,Shaanxi,CHINA;Department of Biochemistry and Molecular Biology,Xi'an Jiaotong University,Xi'an 710061,Shaanxi,CHINA;Department of Neurosurgery,First Affiliated Hospital of Xi'an Jiaotong University,Xi'an 710061,Shaanxi,CHINA)

机构地区：[1]西安大兴医院外科,陕西西安710082 [2]西安交通大学医学部生物化学与分子生物学系,陕西西安710061 [3]西安交通大学第一附属医院神经外科,陕西西安710061

出　　处：《海南医学》

年　　份：2020

卷　　号：31

期　　号：16

起止页码：2041-2047

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、RCCSE、普通刊

摘　　要：目的探讨miR-369-3p对缺氧诱导的海马神经元细胞(Hhn)增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法将Hhn细胞置于持续充入95%N2+5%CO2的密闭培养箱中进行缺氧处理48 h(缺氧组),正常培养的细胞作为对照组。将miR-NC、miR-369-3p、anti-miR-NC、anti-miR-369-3p转染至Hhn细胞中,分别记为miR-NC组、miR-369-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-369-3p组;将anti-miR-NC、anti-miR-369-3p、pcDNA3.1、pcDNA3.1-NAMPT分别转染至Hhn细胞中再进行缺氧处理,分别记为缺氧+anti-miR-NC组、缺氧+anti-miR-369-3p组、缺氧+pcDNA3.1组、缺氧+pcDNA3.1-NAMPT组;将anti-miR-369-3p质粒分别与si-NC、si-NAMPT共转染至Hhn细胞中再进行缺氧处理,分别记为缺氧+anti-miR-369-3p+si-NC组、缺氧+anti-miR-369-3p+si-NAMPT组;转染均采用脂质体法。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-369-3p表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞周期素D1(Cyclin D1)、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和酰胺磷酸核糖转移酶(NAMPT)表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖活性;超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒分别检测SOD活性和MDA含量;双荧光素酶报告基因检测miR-369-3p和NAMPT的靶向关系。结果与对照组比较,缺氧组Hhn细胞中miR-369-3p表达水平升高,NAMPT表达水平降低,P21、Bax表达水平升高,Cyclin D1、Bcl-2表达水平降低,细胞活性降低,细胞凋亡率升高,SOD活性降低,MDA含量升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与缺氧+anti-miR-NC组比较,缺氧+anti-miR-369-3p组miR-369-3p表达水平降低,P21、Bax表达水平降低,Cyclin D1、Bcl-2表达水平升高,细胞活性升高,细胞凋亡率降低,SOD活性升高,MDA含量降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与缺氧+pcDNA3.1组比较,缺氧+pcDNA3.1-NAMPT组NAMPT表达水平升高,P21、Bax表达水平降低,Cyclin D1、Bcl-2表达水平升高,细胞活性升高,细胞凋亡率降低,SOD活性升高,MDA�

关 键 词：Hhn细胞  miR-369-3p  酰胺磷酸核糖转移酶  缺氧诱导 海马神经元细胞 凋亡

分 类 号：R329.21]