文献类型：期刊文章

作　　者：赵云萍[1] 金珊珊[1] 刘琦[1] 王教[1] 王丽花[1] 闫东升[1]

Yunping Zhao;Shanshan Jin;Qi Liu;Jiao Wang;Lihua Wang;Dongsheng Yan(State Key Laboratory of Ophthalmology,Optometry and Vision Science,Eye Hospital,Wenzhou Medical University,Wenzhou 325027,China)

机构地区：[1]温州医科大学附属眼视光医院,省部共建眼视光学和视觉科学国家重点实验室,325027

出　　处：《中华眼视光学与视觉科学杂志》

基　　金：浙江省自然科学基金(LQ17H120009)。

年　　份：2020

卷　　号：22

期　　号：7

起止页码：492-499

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSCD、CSCD2019_2020、IC、JST、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的:探讨EZH2抑制剂3-deazaneplanocin A(DZNep)对人葡萄膜黑色素瘤细胞增殖的影响。方法:实验研究。先采用Western blot法检测EZH2在正常葡萄膜黑色素细胞(UM95、UM96)和葡萄膜黑色素瘤细胞(M23、SP6.5)中的表达,然后在M23和SP6.5细胞的培养基中加入DZNep进行处理,作为实验组;以溶剂DMSO处理作为阴性对照组。采用MTS、平板克隆形成、EdU实验以及流式细胞术分别检测细胞存活、克隆形成能力、细胞增殖以及细胞周期。Western blot技术检测DZNep对细胞中H3K27me3修饰水平,细胞周期相关蛋白以及ERK信号通路的影响。组间数据均采用独立样本t检验进行比较。结果:EZH2在M23和SP6.5细胞中的表达水平与在UM95细胞中的表达相比显著升高(t=25.050,P=0.002;t=14.220,P=0.005)。MTS结果显示,DZNep显著抑制M23和SP6.5细胞的活性,呈浓度和作用时间依赖性。与阴性对照组相比,实验组中M23和SP6.5细胞的克隆形成数量显著降低(t=3.364,P=0.015;t=6.997,P<0.001),并且反映细胞增殖的EdU标记细胞比例明显减少(t=5.117,P=0.002;t=3.399,P=0.015)。流式细胞术检测结果显示,与阴性对照组相比,实验组中M23和SP6.5细胞处于G1期的细胞比例均显著升高(t=6.199,P=0.003;t=3.729,P=0.020)。Western blot检测结果显示,与阴性对照组相比,实验组M23和SP6.5细胞中的EZH2(t=5.214,P=0.035;t=13.530,P=0.005)、p-Rb(t=4.551,P=0.045;t=4.655,P=0.043)、E2F1(t=8.090,P=0.015;t=9.313,P=0.011)以及p-ERK(t=4.819,P=0.040;t=8.951,P=0.012)表达均有降低,H3K27me3修饰水平显著下降(t=5.257,P=0.034;t=5.697,P=0.030)。结论:DZNep能够抑制葡萄膜黑色素瘤细胞的增殖,具有治疗葡萄膜黑色素瘤的应用前景。

关 键 词：葡萄膜黑色素瘤 EZH2 3-deazaneplanocin A  细胞增殖

分 类 号：R739.7]