文献类型：期刊文章

作　　者：畅通[1] 刘飞[1]

CHANG Tong;LIU Fei(Shanghai HILE Bio-Technique Co.Ltd./Shanghai Research Center of Veterinary Biological Engineering and Technology,Shanghai 201403,China)

机构地区：[1]上海海利生物技术股份有限公司,上海兽用生物制品工程技术研究中心,上海201403

出　　处：《畜牧与兽医》

基　　金：上海兽用生物制品工程技术研究中心(19DZ2284700)。

年　　份：2020

卷　　号：52

期　　号：8

起止页码：89-94

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为建立快速、灵敏且特异的检测猪圆环病毒3型(porcine circovirus,PCV)的实时荧光定量PCR方法,本研究根据ORF2基因的保守序列设计一对特异性引物和TaqMan探针,通过构建标准品质粒来制作荧光定量PCR标准曲线,优化反应条件,验证敏感性、特异性及重复性,建立了检测PCV3的实时荧光定量PCR方法。结果显示,该方法可以特异性检测出PCV3,而对猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪细小病毒、伪狂犬病毒等检测结果均为阴性,表明其具有良好的特异性。用构建的标准品质粒测得的灵敏度可以达到10 copies/μL,重复试验批内及批间变异系数均小于2%,表明其具有良好的灵敏性和重复性。以上结果表明,本研究建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏性高、特异性强的优点,可为我国PCV3型的早期检测及相关研究工作提供可靠的技术支持。

关 键 词：猪圆环病毒3型  TAQMAN探针 实时荧光定量PCR

分 类 号：S852.62]