文献类型：期刊文章

作　　者：花璇[1] 王涛[2] 毕言伟[1] 陶裕凯[1] 孔德龙[1] 汤仁仙[1] 吴建伟[3]

HUA Xuan;WANG Tao;BI Yan-wei;TAO Yu-kai;KONG De-long;TANG Ren-xian;WU Jan-wei(Jiangsu Key Laboratory of Immunity and Metabolism,Xuzhou Medical University,Jiang-su 221004,China;Department of Microbiology,College of Basic Medicine,Guizhou Medical University,Giuizhou 550025,China;Department of Parasitology,College of Basic Medicine,Guizhou Medical University,Giuizhou 550025,China)

机构地区：[1]江苏省免疫与代谢重点实验室,江苏徐州221004 [2]贵州医科大学基础医学院微生物学教研室,贵州贵阳550025 [3]贵州医科大学基础医学院寄生虫学教研室,贵州贵阳550025

出　　处：《中国病原生物学杂志》

基　　金：国家自然科学基金项目(No.81360254);江苏省高校优势学科建设工程项目(No.PAPD);江苏省高校青蓝工程资助项目(2017);贵州省科技计划项目学术新苗培养专项项目(黔科合平台人才[2018]5779-22)。

年　　份：2020

卷　　号：15

期　　号：7

起止页码：761-767

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CSCD、CSCD2019_2020、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的设计家蝇抗真菌肽MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu,探讨其抗白色念珠菌(Candida albicans,Ca)活性及作用机制。方法通过氨基酸替换法设计MAF-1A衍生肽Mt6-21DLeu;采用微量液体稀释法测定Mt6-21DLeu对Ca的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MFC)以及不同环境中Mt6-21DLeu对Ca抑菌活性的变化;通过时间-杀菌曲线反映Mt6-21DLeu对Ca的杀菌动力学;通过结晶紫染色测定Mt6-21DLeu对Ca不同阶段生物被膜的清除作用;采用多功能酶标仪检测荧光探针DPH的相对荧光密度;荧光显微镜观察Mt6-21DLeu的细胞膜通透性;采用流式细胞仪检测Mt6-21DLeu影响Ca活性氧ROS生成的影响。结果与MAF-1A相比,Mt6-21DLeu抑制Ca生长的效果提高近5倍,其MIC和MFC分别为0.128 mg/ml和0.256 mg/ml。在盐离子环境中,Mt6-21DLeu活性几乎不受影响,胰酶环境对Mt6-21DLeu有所抑制但远小于对MAF-1A活性的干扰。时间-杀菌曲线结果显示在MIC和2 MIC浓度下,Mt6-21DLeu于9 h后逐渐抑制Ca的生长;4 MIC浓度时Mt6-21DLeu的杀菌能力增强。Mt6-21DLeu在4、24、48 h时均能部分清除Ca已形成的生物被膜,清除效果与Mt6-21DLeu的浓度有关;4 MIC浓度的Mt6-21DLeu能显著增加Ca细胞膜的流动性(P<0.01)及通透性,进而引起Ca菌体内ROS的积累。结论衍生肽Mt6-21DLeu能高效、持久、稳定地抑杀Ca,其抗菌作用可能通过增强细胞膜通透性、促进胞内ROS积累的多靶点模式实现。因此,可将Mt6-21DLeu作为治疗Ca感染的候选药物分子。

关 键 词：家蝇 抗菌肽 衍生肽 白色念珠菌 抑菌活性 活性氧  

分 类 号：R384.2]