文献类型：期刊文章

作　　者：于生金[1] 吕慧明[1] 张贺[1] 鞠薇薇[1] 闫高波[2] 林黎娟[1]

YU Sheng-jin;LYU Hui-ming;ZHANG He;JU Wei-wei;YAN Gao-bo;LIN Li-juan(Institute of Molecular Medicine,Medical College of Eastern Liaoning University,Dandong 118003,P.R.China;Clinical Laboratory,Dandong Central Hospital,Dandong 118000,P.R.China)

机构地区：[1]辽东学院医学院分子医学研究室,辽宁丹东118003 [2]丹东市中心医院检验科,辽宁丹东118000

出　　处：《中华肿瘤防治杂志》

基　　金：辽宁省博士科研启动基金(201601339);辽宁省自然科学基金(20180550356);辽宁省教育厅自然科学基金(LNSJYT201917)。

年　　份：2020

卷　　号：27

期　　号：14

起止页码：1125-1132

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAS、EMBASE、IC、RCCSE、SCOPUS、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的多配体蛋白聚糖-1(syndecan-1,SDC-1)作为乙酰肝素酶-1(heparanase-1,HPA-1)的作用靶点,参与调控癌细胞的恶性行为。本研究旨在探讨HPA-1对人肝癌细胞SDC-1脱落的诱导作用、脱落型SDC-1对细胞增殖和侵袭的影响及SDC-1单克隆抗体的干预效果。方法本研究分为HPA-1小干扰RNA(siHPA-1)转染组,阴性对照小干扰RNA(siNC)转染组,阴性对照小干扰RNA转染后的SDC-1单克隆抗体(siNC+SDC-1IP)处理组和阴性对照小干扰RNA转染后的对照IgG(siNC+IgG IP)处理组。采用siHPA-1、siNC脂质体法转染人肝癌细胞SMMC7721,实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative PCR,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法检测干扰效果。RTFQ-PCR、蛋白质印迹法和酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测HPA-1下调对SDC-1的mRNA表达,以及对细胞质、细胞核、细胞膜SDC-1蛋白水平及SDC-1脱落的影响。采用SDC-1单克隆抗体消除脱落型SDC-1,CCK-8及Transwell法分析SDC-1耗竭对细胞增殖和侵袭的影响。蛋白质印迹法检测SDC-1耗竭后ERK/Akt及FAK/Paxillin信号的磷酸化。结果 siHPA-1下调HPA-1的mRNA(t=20.138,P<0.001)和蛋白(t=10.567,P<0.001)表达,差异有统计学意义。与siNC转染组比较,siHPA-1转染组细胞SDC-1的mRNA表达及细胞质SDC-1蛋白水平差异无统计学意义,但细胞总SDC-1蛋白(t=29.705,P<0.001)及膜SDC-1蛋白(t=13.651,P<0.001)水平增加,相反培养基中的脱落型SDC-1减少(665.56±40.47 vs 97.89±30.20),差异有统计学意义,t=39.062,P<0.001。与siNC+IgG IP处理组比较,siNC+SDC-1IP处理组在24h(0.406±0.098 vs 0.319±0.056,F=6.066,P<0.05)、48h(0.590±0.080vs 0.370±0.085,F=37.579,P<0.01)和72h(0.821±0.106 vs 0.466±0.071,F=69.452,P<0.001)细胞增殖能力下降,差异均有统计学意义。与siNC+IgG IP处理组比较,siNC+SDC-1IP处理组细胞侵袭数(64.3±6.8 vs 18.3±4.6)减少,差异有统计学意义,F=333.039,P<0.001。而且,与siNC+IgG IP处理组比较,siNC+SDC-1IP处理组�

关 键 词：肝癌 多配体蛋白聚糖-1  乙酰肝素酶-1  增殖 侵袭  

分 类 号：R735.7]