文献类型：期刊文章

作　　者：祁宇[1] 窦悦[1] 陈明涛[1] 张亚敏[1] 赵尧烨[1] 杨争艳[1] 王铁成[2] 赵永坤[2] 李元果[2] 孙伟洋[2] 冯娜[2] 任志广[1] 高玉伟[2] 夏咸柱[2]

QI Yu;DOU Yue;CHEN Ming-tao;ZHANG Ya-min;ZHAO Yao-ye;YANG Zheng-yan;WANG Tie-cheng;ZHAO Yong-kun;LI Yuan-guo;SUN Wei-yang;FENG Na;REN Zhi-guang;GAO Yu-wei;XIA Xian-zhu(Joint National Laboratory for Antibody Drug Engineering,Henan University,School of Basic Medical Sciences,Kaifeng,China 475004;Military Veterinary Institute,Academy of Military Medical Sciences)

机构地区：[1]河南大学基础医学院,抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室,河南开封475004 [2]军事科学院军事医学研究院军事兽医研究所

出　　处：《中国病原生物学杂志》

基　　金：国家重点研发计划项目(No.2017YFD0501705);国家自然科学基金项目(No.31902287,81803575);河南省重点研发与推广专项(科技攻关)计划项目(No.192102310301);开封市重点研发与推广专项(科技攻关)计划项目(No.1903018)。

年　　份：2020

卷　　号：15

期　　号：5

起止页码：508-511

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CSCD、CSCD2019_2020、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的原核表达系统表达H5N1亚型禽流感病毒核蛋白(nuclear protein,NP)。方法从H5N1A/meerkat/Shanghai/2012(SH-1),2.3.2.1中提取总RNA,反转录为cDNA后采用PCR扩增NP基因,构建重组质粒经双酶切、测序鉴定正确后转入BL21(DE3)感受态细胞,IPTG诱导重组蛋白的表达,纯化后进行结合活性鉴定。结果构建的重组质粒H5N1NP经双酶切及测序鉴定正确,转化入大肠埃希菌后表达NP蛋白,SDS-PAGE分析其相对分子质量为70×103,与理论值相符。ELISA法检测NP蛋白与相应抗体具有结合活性。结论实现了禽流感病毒H5N1NP重组蛋白的原核表达,表达蛋白具有结合活性,为进一步研究NP蛋白的功能和诊断用单抗的研发奠定了基础。

关 键 词：H5N1流感病毒 NP蛋白 原核表达

分 类 号：R37]