文献类型：期刊文章

作　　者：缪静[1] 刘泽隆[1] 屈慧鸽[1] 迟晓艳[1] 朱甫祥[1]

MIAO Jing;LIU Ze-Long;QU Hui-Ge;CHI Xiao-Yan;ZHU Fu-Xiang(Department of Biopharmaceuticals,College of Life Sciences,Ludong University,Yantai 264025,Shandong,China)

机构地区：[1]鲁东大学生命科学学院生物制药系,山东烟台264025

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》

基　　金：2019年山东省重点研发计划公益性科技攻关资助项目(No.2019GSF107083);山东省自然科学基金资助项目(No.ZR2010CM061)资助。

年　　份：2020

卷　　号：36

期　　号：6

起止页码：708-714

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、JST、PUBMED、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：甲型血友病基因治疗疗效受凝血因子VIII(FVIII)表达水平低下的制约。FVIII分泌低效,且活化产物的A2区易于自发脱落使其容易失活。犬属FVIII(cFVIII)的胞内Furin水解酶裂解位点变异,使其主要以单链多肽形式分泌,而人源FVIII(hFVIII)受Furin水解,主要以重链(HC)和轻链(LC)非共价二聚体形式分泌,这种差异使cFVIII分泌性和比活性均高于hFVIII。我们前期的工作在人源B结构域缺失型FVIII(hBDD-FVIII)HC的A2与轻链LC的A3区引入链间二硫键表明,HC和LC二聚体的分泌性得到改善,活化产物稳定性和血浆凝血活性提高。本文构建一种新型hBDD-FVIII变构体F8C-RH,包含链间二硫键突变M226C/D1828C和Furin水解位点突变R1645H。培养的CHO和BHK细胞转基因表明,F8C-RH的分泌性和活性有明显改善。小鼠门静脉注射肝靶向转基因,血浆F8C-RH浓度和凝血活性均明显升高。为进一步腺相关病毒(AAV)载体转F8C-RH的甲型血友病基因治疗研究提供了依据。

关 键 词：凝血因子VIII 新型人BDD-FVIII变构体  分泌 活性

分 类 号：Q812[生物工程类] Q518.4