文献类型：期刊文章

作　　者：王玉鑫[1] 张世梅[1] 闵婷婷[1] 张琢奇[1] 赵跃[1]

WANG Yu-Xin;ZHANG Shi-Mei;MIN Ting-Ting;ZHANG Zhuo-Qi;ZHAO Yue(Department of Physiology and Pathophysiology,School of Basic Medical Sciences,Dali University,Dali 671000,Yunnan,China)

机构地区：[1]大理大学基础医学院,生理学与病理生理学教研室,云南大理671000

出　　处：《中国生物化学与分子生物学报》

基　　金：云南省应用基础研究计划-面上项目(No.2018FB116);大理大学人才培养基金项目(No.KY171921501);大理大学代谢相关疾病基础研究创新团队(No.ZKLX2020306)资助。

年　　份：2020

卷　　号：36

期　　号：5

起止页码：592-600

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、JST、PUBMED、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：肥厚型心肌病(hypertrophic cardiomyopathy,HCM)的分子遗传学基础为基因突变。本研究旨在建立一种用于HCM致病相关基因热点突变位点的Taqman-MGB实时荧光PCR检测方法。以HCM患者基因组为模板,根据设计好的引物进行PCR扩增,分别构建5个与HCM致病相关热点突变位点(MYH7-c.1987C>T、TNNI3-c.370G>C、MYH7-c.2155C>T、TNNI3-c.433C>G和PRKAG2-c.298G>A)的野生型、纯合突变型和杂合突变型阳性质控品。以阳性质控品为模板,对5对引物和探针组合物的灵敏性、重复性和特异性进行验证。研究结果表明,对阳性质控品10倍梯度稀释(10-1~10-7),PCR扩增标准曲线R2>0.996;批间和批内重复性验证其变异系数均小于2%;特异性验证显示,探针与模板匹配的荧光信号较强。以上结果表明,引物探针组合物的灵敏性、重复性和特异性较好。此外,以阳性HCM患者基因组为模板,对引物探针组合物进行回复性验证,其检测结果与毛细管电泳一致。综上所述,本研究利用Taqman-MGB实时荧光PCR检测技术,建立了经济、快速、灵敏的HCM热点突变位点检测方法。该方法的建立,有助于HCM临床分子诊断、治疗和愈后评估。

关 键 词：肥厚型心肌病 Taqman-MGB  基因检测 热点突变

分 类 号：Q-33[生物科学类] R394]