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植原体TaqMan探针实时荧光PCR检测鉴定方法的建立
ESTABLISHMENT OF REAL-TIME FLUORESCENT PCR METHOD WITH TaqMan PROBE FOR PHYTOPLASMA DETECTION AND IDENTIFICATION
文献类型:期刊文章
机构地区:[1]湖南农业大学植保系,长沙410128 [2]国家质检总局动植物检疫实验所,北京100029 [3]西北农林科技大学,杨凌712100
年 份:2002
卷 号:32
期 号:4
起止页码:361-367
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2000、CAB、CAS、CSCD、CSCD2011_2012、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:本研究成功建立了植原体分类鉴定和检测的 Taq Man探针实时荧光 PCR方法 ,该方法根据植原体 16S r DNA保守区设计了 1个 Taq Man广谱探针和 3个植原体组间点突变特异性探针 ,并对 9种植原体和 5种细菌以及 3个植物样本进行实时荧光 PCR。结果表明 ,用广谱探针可检测到所有植原体产生荧光信号 ,而细菌不产生荧光信号。当用植原体组间特异性探针检测时 ,仅能检测到该组植原体产生荧光信号 ,检测的敏感性比常规的 PCR-电泳检测高约 10 0倍、检测速度有较大提高。由于PCR产物是荧光探针检测 ,本方法特异性强 ,并可以用组特异探针直接确定植原体种类。实验采用完全闭管检测 ,降低了污染机会。本研究为其它原核生物、特别是不能培养菌。
关 键 词:植原体 TAQMAN探针 实时荧光 PCR 检测鉴定方法
分 类 号:S432.4]
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