文献类型：期刊文章

作　　者：晏飞利[1] 李慧[1] 李春红[1]

YAN Feili;LI Hui;LI Chunhong(Department of Pharmaceutical Sciences of School of Pharmacy,Southwest Medical University,Luzhou 646000,Sichuan Province,China)

机构地区：[1]西南医科大学药学院药剂学教研室,四川泸州646000

出　　处：《西南医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(81803478);四川省科技厅创新苗子工程项目(2017RZ0048)。

年　　份：2020

卷　　号：43

期　　号：3

起止页码：238-241

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：目的:提取和鉴定巨噬细胞来源的外泌体,为后续开展外泌体相关的研究建立稳定的提取方法,并为当前外泌体的提取方法提供一定参考。方法:使用超速离心结合过滤法提取鼠源巨噬细胞培养上清液中的外泌体;通过马尔文粒度分析仪测定其粒径大小和电位,透射电镜观察其形态特征,BCA试剂盒测定外泌体的含量,同时用Western Blot技术验证外泌体的特征蛋白CD9和CD63的表达。结果:从鼠源巨噬细胞培养上清液中分离出的外泌体,马尔文粒度分析显示粒径大小为(97.3±5.73)nm,Zeta电位为-21.26±1.72。透射电镜下观察可见茶托样、均质、具有膜样结构的微小囊泡,直径约100 nm;20 mL培养基能分离出约64μg外泌体,Western Blot实验结果显示特征蛋白分子CD9和CD63在外泌体提取物中表达丰度高,而在提取后的细胞上清液中没有检测到表达。结论:本研究利用超速离心结合过滤法成功分离了鼠源巨噬细胞来源的外泌体,其形态均匀,提取含量及纯度较高。

关 键 词：巨噬细胞 外泌体 提取  鉴定  

分 类 号：R331]