文献类型：期刊文章

作　　者：周巧[1] 李佳会[2] 庞金龙[2] 范方田[2] 李姗姗[2] 刘浩[2]

ZHOU Qiao;LI Jiahui;PANG Jinlong;FAN Fangtian;LI Shanshan;LIU Hao(School of Clinical Medicine,Bengbu Medical College,Anhui Biochemical Pharmaceutical Engineering Technology Research Center,Bengbu 233000,China;School of Pharmacy,Bengbu Medical College,Anhui Biochemical Pharmaceutical Engineering Technology Research Center,Bengbu 233000,China)

机构地区：[1]蚌埠医学院临床医学院,安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽蚌埠233000 [2]蚌埠医学院药学院,安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽蚌埠233000

出　　处：《南方医科大学学报》

基　　金：国家自然科学基金(81372899);安徽省自然科学基金(1908085QH373);安徽省学术和技术带头人及后备人选学术科研活动资助经费(2019H215);蚌埠医学院科技发展基金(BYKF1816);大学生创新创业项目(201810367005)。

年　　份：2020

卷　　号：40

期　　号：6

起止页码：884-892

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探究吉非替尼对非小细胞肺癌A549和H1975细胞死亡形式的影响,并从糖酵解方面探讨其可能机制。方法A549细胞加入浓度分别为0、20、30、40μmol/L的吉非替尼,H1975细胞加入浓度分别为0、20、40、80μmol/L的吉非替尼。采用MTT法检测吉非替尼对非小细胞肺癌细胞的增殖抑制作用。用乳酸试剂盒检测细胞内乳酸的变化,Western blot法检测细胞内糖酵解相关蛋白(PKM2、HK2)和PI3K-Akt-m TOR信号通路中蛋白的表达水平;2-NBDG检测细胞葡萄糖摄取能力,ATP试剂盒检测胞内ATP水平;JC-1试剂盒检测细胞线粒体膜电位,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot法检测凋亡蛋白(Bax、Bcl-2)以及自噬标志蛋白LC3B的相对表达水平。结果MTT结果显示吉非替尼可呈时间剂量依赖性的抑制A549和H1975细胞增殖(P<0.05),A549细胞24、48、72 h的IC50值分别为48.6、28.6和19.7μmol/L,H1975细胞24、48、72 h的IC50值分别为321.6、49.1和14.6μmol/L。乳酸检测结果显示,吉非替尼抑制胞内乳酸水平(P<0.05)。Western blot结果显示,糖酵解相关蛋白PKM2、HK2表达下调(P<0.05),PI3K-Akt-m TOR信号通路中相关蛋白表达下调(P<0.05)。吉非替尼也可以抑制A549和H1975细胞葡萄糖摄取、ATP水平(P<0.05)。JC-1试剂盒和Annexin V-FITC/PI双染法检测出吉非替尼能够诱导A549和H1975细胞发生凋亡,A549细胞中0、20、30、40μmol/L的凋亡率分别为(10.77±1.0)%、(14.5±0.4)%、(17.4±0.2)%、(32.1±0.6)%,差异有统计学意义(P<0.05);而H1975细胞0、20、40、80μmol/L的凋亡率分别为(10.5±0.6)%、(13.2±0.92)%、(18.9±0.98)%、(35.1±1.4)%,差异有统计学意义(P<0.05)。促凋亡蛋白Bax表达增加和抑凋亡蛋白Bcl-2表达下调(P<0.05)。同时LC3B表达增加证明吉非替尼能够诱导A549和H1975细胞自噬增加(P<0.05)。结论吉非替尼对A549和H1975细胞具有增殖抑制、诱导凋亡和增加自噬作用,凋亡机制可能为吉非替尼影响A549和H197

关 键 词：吉非替尼 非小细胞肺癌 糖酵解 死亡形式  

分 类 号：R734.2]