文献类型：期刊文章

作　　者：邓春艳[1] 王晗月[2,3] 李宁[1] 蒋豆蔻[2] 俞丽娜[1] 欧阳志斌[1] 李富荣[2]

DENG Chun-yan;Wang Han-yue;LI Ning;JIANG Dou-kou;YU Li-na;OUYANG Zhi-bin;LI Fu-rong(Biotherapy Room,The Second Clinical Medical College of Jinan University(Shenzhen People’s Hospi⁃tal),Shenzhen 518020,China;Translational Medicine Collaborative Innovation Center,Shenzhen Key Laboratory of Stem Cell Re⁃search and Clinical Transformation,The Second Clinical Medical College of Jinan University(Shenzhen People’s Hospi⁃tal),Shenzhen 518020,China;Department of Pathophysiology,School of Medicine,Jinan University,Guangzhou 510632,China)

机构地区：[1]暨南大学第二临床医学院(深圳市人民医院)生物治疗室,广东深圳518020 [2]暨南大学第二临床医学院(深圳市人民医院)转化医学协同创新中心,深圳市干细胞研究与临床转化重点实验室,广东深圳518020 [3]暨南大学基础医学院病理生理学系,广东广州510632

出　　处：《中国病理生理杂志》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.81670702);广东省自然科学基金资助项目(No.2015A030313762)。

年　　份：2020

卷　　号：36

期　　号：5

起止页码：877-885

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的:探讨微小RNA-375(miR-375)在调控人类诱导多能干细胞(hiPSCs)分化为胰岛素分泌细胞(IPCs)过程中的作用及可能机制。方法:构建miR-375过表达的慢病毒载体,转染hiPSCs获得miR-375稳定表达的miR-375-hiPSCs,体外诱导其定向分化为IPCs,采用real-time PCR、流式细胞术及ELISA等方法对其标志性基因、分化效率、胰岛素和C肽释放量等进行检测;生物信息学结合萤光素酶报告基因实验预测并验证miR-375的靶基因,real-time PCR及Western blot检测靶基因的表达。结果:过表达miR-375可上调胰岛β细胞标志性转录因子HNF4α、MafA、Pdx1、Pax6、Nkx6.1、glucokinase和insulin的表达,分化效率由对照组的22.3%提高至38.6%;高糖刺激后胰岛素释放量由成年胰岛细胞分泌量的1/8提高到1/5;过表达miR-375可影响靶基因REST和WNT5A的蛋白翻译水平。结论:miR-375可通过干扰靶基因REST和WNT5A的翻译水平,开启胰岛素分泌相关特异性基因的表达,从而促进hiPSCs向IPCs定向分化。

关 键 词：人类诱导多能干细胞  微小RNA-375  胰岛素分泌细胞

分 类 号：R329.25] R363.2[基础医学类]