文献类型：期刊文章

作　　者：王大维[1,2] 李振业[1] 高华[1]

WANG Dawei;LI Zhenye;GAO Hua(Beijing Neurosurgical Institute,Beijing 100070,China)

机构地区：[1]北京市神经外科研究所,北京100070 [2]首都医科大学第八临床医学院

出　　处：《山东医药》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81601205)。

年　　份：2020

卷　　号：60

期　　号：9

起止页码：1-5

语　　种：中文

收录情况：CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、EBSCO、IC、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的观察微小RNA-374-5p(miR-374-5p)对大鼠垂体泌乳素腺瘤细胞系MMQ增殖、凋亡、侵袭的影响,并探讨其作用机制。方法将对数生长期MMQ细胞分为A、B、C、D组。A组加入常规培养基,B组加入miR-374-5p类似物,C组加入miR-374-5p抑制剂,D组加入miR-374-5p类似物和miR-374-5p抑制剂。各组培养0、24、48、72 h时,酶标仪在490 nm波长处检测各组细胞光密度值(OD值,以OD值表示细胞增殖能力)。各组细胞培养72 h时,离心收集细胞,加入Annexin V-FITC和PI染色,流式细胞仪检测Annexin V染色阳性细胞百分数和PI染色阳性细胞百分数(以Annexin V染色阳性细胞百分数和PI染色阳性细胞百分数表示细胞凋亡能力)。各组细胞培养72 h时,采用实时定量PCR法检测各组细胞侵袭相关基因[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、蜗牛家族转录阻遏物1(Snail)、波形蛋白(Vimentin),以侵袭相关基因mRNA的相对表达量表示细胞侵袭能力]及垂体肿瘤转化基因(PTTG)mRNA。将野生型(WT)PTTG荧光素酶载体和突变型(mut)PTTG荧光素酶载体分别与microRNA-NC或miR-374-5p类似物共转染至MMQ细胞,记为NC-WT组、NC-mut组、WT组、mut组,转染72 h后,使用双荧光素酶报告基因检测系统检测细胞上清液中荧光素酶活性。结果与A、D组相比,培养24、48、72 h时,B组细胞增殖能力显著降低(P均<0.05),C组细胞增殖能力显著升高(P均<0.05)。A、B、C、D组Annexin V染色阳性细胞百分数分别为3.7%±1.4%、17.6%±5.3%、3.4%±1.5%、4.5%±1.4%,PI染色阳性细胞百分数分别为2.4%±0.9%、11.2%±3.7%、2.5%±1.2%、2.7%±0.9%,其中B组Annexin V染色阳性细胞百分数和PI染色阳性细胞百分数与A、C、D组相比,P均<0.05。与A、D组相比,B组细胞E-cadherin mRNA、PTTG mRNA相对表达量显著降低(P均<0.05),N-cadherin mRNA相对表达量显著升高(P均<0.05)。NC-WT组、NC-mut组、WT组、mu

关 键 词：微小RNA 微小RNA-374-5p  MMQ细胞  泌乳素腺瘤 垂体肿瘤转化基因 细胞增殖  细胞凋亡  E-钙黏蛋白 N-钙黏蛋白  

分 类 号：R736.4]