文献类型：期刊文章

作　　者：高鹏[1] 覃诗琪[1] 唐美芳[2]

GAO Peng;QIN Shiqi;TANG Meifang(Technique Center,Wuhan BGI Clinical Laboratory Co.,Ltd,Wuhan 430074,Hubei,China;BGI College,University of Chinese Academy of Sciences,Shenzhen 518083,Guangdong,China)

机构地区：[1]武汉华大医学检验所有限公司技术中心,湖北武汉430074 [2]中国科学院大学华大教育中心,广东深圳518083

出　　处：《检验医学》

年　　份：2020

卷　　号：35

期　　号：3

起止页码：264-269

语　　种：中文

收录情况：AJ、CAS、CSA-PROQEUST、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的将新生儿遗传代谢病筛查(简称“新筛”)后剩下的干血斑继续用于耳聋基因提取和飞行质谱检测,从而减少耳聋基因检测过程中的取样频次并缩短检测周期。方法在碱水煮沸法提取耳聋基因的基础上优化碱水的pH值和用量,使“新筛”干血斑DNA提取浓度达到新鲜血斑水平。结果用pH值为9、10、11、12的碱水从干血斑中提取DNA时,DNA的浓度与碱水pH值呈正相关(r=0.906,P=0.094),20个耳聋基因位点均能被正常检出;当pH值达到12时,质谱峰图信号响应值减小,检测质量下降。用60、70、80、90μL pH值为11的碱水从“新筛”干血斑中提取DNA时,DNA浓度与碱水体积呈负相关(r=-0.988,P=0.012);用90μL pH值为11的碱水时,有1例样本547G>A位点基因被漏检,用80μL pH值为11的碱水时,DNA提取浓度和新鲜血斑最接近(t=0.035,P=0.974),同时质谱峰图良好。结论用80μL pH值为11的煮沸碱水从“新筛”干血斑中提取DNA,可获得较好的耳聋质谱检测结果,为搭建“新筛”和耳聋自动化检测平台提供一定的技术参考。

关 键 词：干血斑 新生儿遗传代谢病筛查  耳聋 提取  

分 类 号：R446.1]