文献类型：期刊文章

作　　者：施彦[1] 涂龙翔[2] 邓琴[2] 张亚萍[2] 胡洋红[3] 刘德伍[2]

Shi Yan;Tu Longxiang;Deng Qin;Zhang Yaping;Hu Yanghong;Liu Dewu(Department of Plastic and Aesthetic Surgery,Maternal and Child Health Hospital Affiliated to Nanchang University,Jiangxi Maternal and Child Health Hospital,Nanchang 330006,China;Department of Burns,the First Affiliated Hospital of Nanchang University,Nanchang 330006,China;Clinical Skills Center,Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine,Nanchang 330004,China)

机构地区：[1]江西省妇幼保健院南昌大学附属妇幼保健院医学美容科,330006 [2]南昌大学第一附属医院烧伤科,330006 [3]江西中医药大学临床技能中心,南昌330004

出　　处：《中华烧伤杂志》

基　　金：国家自然科学基金(81460293)。

年　　份：2020

卷　　号：36

期　　号：3

起止页码：195-203

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、EMBASE、IC、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨经外源性血管内皮生长因子(VEGF)处理的大鼠表皮干细胞(ESC)对深Ⅱ度烧伤大鼠创面愈合的影响及机制。方法从1只3个月龄雌性SD大鼠躯干皮肤分离获得ESC,取第3代对数生长期细胞进行实验(1)^(3)。(1)取细胞,采用角质形成细胞专用无血清培养基(K-SFM)常规培养(常规培养条件下同),于倒置光学显微镜下观察培养3、5 d细胞形态。(2)取细胞常规培养24 h,流式细胞仪检测细胞表面标志物CD44、CD45、CD11b和CD11c的表达,样本数为3。(3)取4个批次细胞,各批次细胞均采用随机数字表法分为空白对照组和VEGF组。空白对照组细胞常规培养,VEGF组细胞用含终质量浓度为10 ng/mL VEGF的K-SFM培养。1个批次细胞培养10 d,采用蛋白质印迹法检测细胞角蛋白19(CK19)、CK10蛋白表达;1个批次细胞培养0(即刻)、2、4、6、8、10 d,分别取细胞采用实时荧光定量反转录PCR法检测Nanog mRNA表达;1个批次细胞培养2、4、6、8、10 d,分别取细胞采用细胞计数试剂盒8测定吸光度值;1个批次细胞培养10 d,光学显微镜下观察计数>50个细胞的克隆数,计算细胞克隆形成率。各批次细胞各时间点样本数均为3。(4)选取36只3个月龄雌雄不限SD大鼠,用100℃铁质圆片在每只大鼠背部两侧压迫10 s制作2个直径为10 mm的深Ⅱ度烫伤(下称烧伤)创面。按随机数字表法将致伤大鼠分为VEGF+ESC组、单纯ESC组及空白对照组,每组12只大鼠、24个创面。伤后0(即刻)~2 d,3组大鼠每个创面均每天一次性注射20μL磷酸盐缓冲液(PBS),其中VEGF+ESC组PBS中含0.8×10^6个/mL经10 ng/mL VEGF处理10 d的ESC、单纯ESC组PBS中含0.8×10^6个/mL未经任何处理的ESC、空白对照组PBS中不含任何其他物质。于首次注射后(下称注射)0(即刻)、3、7、14 d,先按随机数字表法于每组分别取3只大鼠观察并记录创面愈合情况,计算注射3、7、14 d创面愈合率;随后处死各时间点大鼠切取创面�

关 键 词：烧伤  伤口愈合 血管内皮生长因子类 细胞增殖  细胞分化 表皮干细胞

分 类 号：R632.1] R826.3[临床医学类]