文献类型：期刊文章

作　　者：王春苗[1] 卢致民[1] 王燕[1]

WANG Chun-miao;LU Zhi-min;WANG yan(Department of Pathogenic Biology,School of Medical Laboratory,Hebei North University,Zhangjiakou,Hebei 075000,China)

机构地区：[1]河北北方学院医学检验学院病原生物学教研室

出　　处：《河北北方学院学报（自然科学版）》

基　　金：河北省高等学校科学技术研究项目(No.Z2017025);河北北方学院创新人才培育项目(No.CXRC1326)

年　　份：2019

卷　　号：35

期　　号：12

起止页码：1-4

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：目的构建弓形虫速殖子λ噬菌体展示文库,为后期免疫筛选做准备。方法通过Trizol试剂提取弓形虫RH株速殖子总RNA,再利用SMART技术进行反转录合成双链cDNA。对cDNA进行纯化后,通过Sfi I酶切消化双链cDNA并切胶回收,与λTripIEx2载体的两臂连接,最后通过λ噬菌体包装蛋白进行体外包装,以构建λ噬菌体展示文库。对文库进行滴度测定,并进行重组率检测。结果RNA提取结果良好,未扩增文库滴度为8.0×10^6 pfu·mL^-1,文库重组率为95%。随机挑取50个噬菌斑进行PCR鉴定,插入片段分布在0.5~3 kb。结论成功构建了弓形虫速殖子λ噬菌体展示文库,为后期疫苗的研究奠定基础。

关 键 词：弓形虫速殖子 疫苗 λ噬菌体展示文库  

分 类 号：S85[动物医学类]