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条斑紫菜酵母双杂交文库的构建及PyMAPK5互作蛋白的筛选
CONSTRUCTION OF A TWO-HYBRID LIBRARY OF PYROPIA YEZOENSIS AND SCREENING OF PYMAPK5 INTERACTION PROTEIN
文献类型:期刊文章
DONG Dao-Ying;KONG Fan-Na;CUI Zheng-Cai;SUN Bin(The Key Laboratory of Marine Genetics and Breeding,Ministry of Education,Ocean University of China,Qingdao 266003,China)
机构地区:[1]中国海洋大学海洋生命学院海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室
基 金:国家自然科学基金项目,31672641号
年 份:2019
卷 号:50
期 号:6
起止页码:1271-1280
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2019_2020、IC、JST、PROQUEST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:为进一步研究条斑紫菜促分裂原活化激酶家族PyMAPK5的下游互作蛋白,理解其生物学功能,本研究通过酵母双杂交的方法进行其相互作用蛋白的筛选。提取不同温度和失水逆境胁迫下的RNA,利用Invitrogen体系构建条斑紫菜酵母双杂交cDNA文库,其库容为1.44×107CFU,重组率为91.8%。以pGBKT7-PyMAPK5为诱饵蛋白载体,利用共转化方法,从文库中筛选得到26个与PyMAPK5互作的候选蛋白。候选蛋白集中在光系统II相关蛋白、捕光蛋白、微管蛋白、ATP酶、GTP结合蛋白及假设蛋白等。微管蛋白、捕光蛋白、光系统II蛋白一对一验证结果为阳性,表明在酵母体内存在互作。本研究为阐明条斑紫菜PyMAPK5与其互作蛋白的关系及解析PyMAPK5下游作用机制奠定了基础。
关 键 词:PyMAPK5 条斑紫菜 酵母双杂交 互作蛋白 逆境胁迫
分 类 号:Q943[植物生产类]
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