文献类型：期刊文章

作　　者：张杰[1] 刘雪威[1] 白娟[1] 宋中宝[1] 姜平[1]

ZHANG Jie;LIU Xue-wei;BAI Juan;SONG Zhong-bao;JIANG Ping(College of Veterinary Medicine,Nanjing Agricultural University/Key Laboratory of Animal Bacteriology of the Ministry of Agriculture,Nanjing 210095,China)

机构地区：[1]南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点实验室

出　　处：《中国兽医科学》

基　　金：国家重点研发计划项目(2018YFD0500803);江苏省重点研发计划重点项目(BE2018386);国家生猪产业技术体系专项(CARS-36)

年　　份：2019

卷　　号：49

期　　号：12

起止页码：1505-1513

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2019_2020、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：本研究根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF7基因序列,设计出一对引物,建立了检测该病毒的SYBR GreenⅠ染料荧光定量PCR方法。此法特异性高,与猪流行性腹泻(PEDV)、猪瘟病毒(CSFV)、塞内卡谷病毒(SVV)、脑心肌炎病毒(EMCV)、伪狂犬病病毒(PRV)和猪圆环病毒2型(PCV2)均无交叉反应;采用不同滴度的PRRSV测定,当Ct≤32且有明显的指数扩增曲线,判定为PRRSV阳性,Ct>32或者无Ct值则判定为PRRSV阴性。该方法检测下限为1×10^0.5TCID50病毒,高于常规RT-PCR国家标准(GB/T18090-2008),批内和批间变异系数均小于1%。PRRSV人工感染仔猪15份肺脏组织和60份血清样品检测结果均为阳性,SPF仔猪8份肺脏组织和25份血清检测结果均为阴性。采集245份临床仔猪肺脏组织病料检测,PRRSV阳性率为67.35%,明显高于普通RT-PCR检测阳性率(56.33%)。上述结果表明,本方法可用于PRRSV临床病料检测。

关 键 词：猪繁殖与呼吸综合征 SYBR GreenⅠ  实时荧光定量PCR

分 类 号：S852.651]