文献类型：期刊文章

作　　者：蔡尚党[1] 蔡满地[2] 娄宁[3] 郭艳萍[4] 殷涛[5]

CAI Shang-Dang;CAI Man-Di;LOU Ning(Department of Anus-intestines,Henan Province Traditional Chinese Medicine Hospital,Zhengzhou 450002,Henan,China)

机构地区：[1]河南省中医院肛肠科,河南郑州450002 [2]河南大学医学院临床医学系 [3]中山大学附属肿瘤医院ICU [4]河南省人民医院病理科 [5]华中科技大学同济医学院附属协和医院胰腺病研究所

出　　处：《中国老年学杂志》

基　　金：国家自然科学基金(No.81372665)

年　　份：2019

卷　　号：39

期　　号：24

起止页码：6055-6059

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA-PROQEUST、IC、JST、RCCSE、核心刊

摘　　要：目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)抑制结肠癌干细胞(CCSCs)干性对结肠癌细胞生长的影响及相关分子机制。方法将慢病毒介导的p53特异性短发来RNA(shRNA)转导入CCSCs,构建敲低p53表达的shRNA-p53-CCSCs细胞系。然后将正常CCSCs和shRNA-p53-CCSCs分别分成以下处理组:阴性对照组、DMSO组、舒林酸组和5-FU组,舒林酸组细胞经10μg/ml舒林酸处理,5-FU组细胞经2.5μg/ml 5-FU处理,然后通过BrdU检测试剂盒检测正常CCSCs和shRNA-p53-CCSCs活性,末端转移酶dUTP切口末端标记检测细胞凋亡情况,球体形成实验检测细胞干性变化,Western印迹检测处理后细胞中线粒体凋亡途径相关蛋白Bax/Bcl-2和细胞色素c,β-连环蛋白及其下游靶蛋白c-Myc和cyclinD1表达情况。结果与阴性对照组相比,5-FU组正常CCSCs增殖速率下降了52%,凋亡率为31%(P<0.05),而shRNA-p53-CCSCs增殖速率下降了73%,凋亡率为42%(P<0.05),舒林酸组正常CCSCs增殖速率下降了47%(P<0.05)。球体形成实验检测结果表明,5-FU和舒林酸均显著抑制CCSCs球体形成,且与阴性对照组相比,5-FU和舒林酸组球体体积显著下降(P<0.05),5-FU处理后正常CCSCs中Bax/Bcl-2比例升高约4倍,正常CCSCs与shRNA-p53-CCSCs中细胞色素c表达分别升高约2.8倍,2.5倍,β-连环蛋白在正常CCSCs的胞质和胞核中分别下降75%,73%,在shRNA-p53-CCSCs中分别下降81%,80%,而c-Myc和cyclinD1在上述两种细胞中的表达分别下降83%,52%和47%,53%。结论 5-FU能通过抑制Wnt/β-连环蛋白信号通路并上调线粒体介导的细胞凋亡抑制CCSCs增殖并促进细胞凋亡,具有潜在的抗肿瘤性。

关 键 词：结肠癌干细胞 5-氟尿嘧啶 P53 Β-连环蛋白

分 类 号：R285[中药学类]