期刊文章详细信息
利用酵母双杂交系统筛选大豆结瘤因子受体NFR1α的互作蛋白
Screening of NFR1α-interactive proteins in soybean using yeast two hybrid system
文献类型:期刊文章
KE Dan-Xia;PENG Kun-Peng(College of Life Sciences,Xinyang Normal University/Institute for Conservation and Utilization of Agro-bioresources in Dabie Mountains,Xinyang 464000,Henan,China)
机构地区:[1]信阳师范学院生命科学学院/大别山农业生物资源保护与利用研究院
基 金:国家自然科学基金项目(31400213);河南省科技攻关计划项目(182102110448);信阳师范学院“南湖学者奖励计划”青年项目(2016)资助~~
年 份:2020
卷 号:46
期 号:1
起止页码:31-39
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2019_2020、EBSCO、FSTA、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊
摘 要:大豆是重要的植物蛋白作物和粮豆间作作物,挖掘大豆的生物固氮潜力,对推动生态农业的可持续发展具有深远意义。大豆结瘤因子受体蛋白GmNFR1?(Nod Factor Receptor)对结瘤至关重要,但其具体调控机制尚不明确。本研究以大豆mRNA为模板,利用RT-PCR方法扩增到GmNFR1α蛋白的激酶结构域(GmNFR1α-pk),构建了pGBKT7-GmNFR1α-pk诱饵表达载体,通过酵母双杂交技术,筛选大豆根瘤AD-cDNA文库,从文库中分离到与GmNFR1α-pk相互作用的71个阳性克隆,经测序和同源性分析筛选到12种与GmNFR1α-pk互作的蛋白,包括钙离子结合手性蛋白、豆血红蛋白、结瘤素Nod44等蛋白。以大豆豆血红蛋白GmLbc2为例,回转酵母以及烟草体内BiFC验证其与诱饵蛋白的相互作用,对其进行同源蛋白比对及系统进化树分析,并利用百脉根毛根转化技术鉴定GmLbc2在结瘤过程中的生物学功能。研究结果进一步补充和完善了GmNFR1α介导的结瘤信号传递途径,为大豆与根瘤菌共生互作机制提供了新的分子证据。
关 键 词:大豆 共生固氮 结瘤因子受体蛋白 酵母双杂交 豆血红蛋白
分 类 号:TS2[食品科学与工程类]
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引证文献:
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