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猪伪狂犬病病毒野毒株与疫苗株荧光定量PCR检测方法的建立和应用
Establishment and application of a real-time fluorescent quantitative PCR for pseudorabies wild-type virus and vaccine virus
文献类型:期刊文章
WANG Ya-ting;ZHAO Ling-yan;CHAI Juan;YU Yi-cong;DONG Jian-fei;NI Bai-feng;ZHOU Lei;XU Hui;XIE Rong-hui(Zhejiang Center of Animal Disease Control,Hangzhou 310018,China)
机构地区:[1]浙江省动物疫病预防控制中心
基 金:浙江省公益技术研究项目(2017C32016);浙江省“三农六方”科技协作项目
年 份:2019
卷 号:49
期 号:11
起止页码:1354-1360
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2019_2020、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:根据伪狂犬病病毒gD、gE基因序列设计2对引物及其对应的探针,通过对引物、探针浓度的优化,建立了猪伪狂犬病病毒野毒和减毒活疫苗株荧光定量PCR检测鉴别方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪流行性乙型脑炎病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪博卡病毒、猪流行性腹泻病毒和猪传染性胃肠炎病毒均无扩增曲线。野毒株均出现gD和gE基因扩增曲线,而疫苗株只出现了gD基因扩增曲线,表明该检测方法具有良好的特异性。建立的gD和gE基因标准曲线Ct值和模板终浓度在1×10^8~1×10 copies/μL范围内均具有良好的线性关系,灵敏度均可达1×10 copies/μL。对39份猪组织样品进行检测,荧光定量PCR检出5份样品猪伪狂犬病病毒gD、gE阳性,表明这5份猪组织样品为猪伪狂犬病病毒野毒感染。常规PCR检出5份猪伪狂犬病病毒阳性,经测序为野毒感染,2种方法符合率为100%。本研究建立的荧光定量PCR可用于猪伪狂犬病病毒的快速检测和流行病学调查。
关 键 词:伪狂犬病病毒 荧光定量PCR
分 类 号:S852.659.1]
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