文献类型：期刊文章

作　　者：刘运超[1] 陈玉梅[2] 冯丽丽[3] 汪磊[1] 王聚财[1] 陆东峰[4] 张改平[1]

LIU Yunchao;CHEN Yumei;FENG Lili;WANG Lei;WANG Jucai;LU Dongfeng;ZHANG Gaiping(Key Laboratory of Animal Immunology,Henan Academy of Agricultural Sciences/Key Laboratory of Animal Immunology,Ministry of Agriculture,Zhengzhou 450002,China;School of Life Sciences,Zhengzhou University,Zhengzhou 450001,China;Institute of Agricultural Economics and Information,Henan Academy of Agricultural Sciences,Zhengzhou 450002,China;Henan Huahuaniu Industrial Cooparation,Zhengzhou 450006,China)

机构地区：[1]河南省农业科学院动物免疫学重点实验室/农业部动物免疫学重点开放实验室,河南郑州450002 [2]郑州大学生命科学学院,河南郑州450001 [3]河南省农业科学院农业经济与信息研究所,河南郑州450002 [4]河南花花牛实业总公司,河南郑州450006

出　　处：《河南农业科学》

基　　金：国家重点研发计划项目(2016YFD0500704;2017YFD0501103)

年　　份：2019

卷　　号：48

期　　号：12

起止页码：114-120

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为了获得具有中和活性的抗猪瘟病毒(CSFV)单克隆抗体,分别将CSFV和杆状病毒表达系统表达纯化的CSFV E2蛋白与佐剂混合后免疫BABL/c小鼠,经杂交瘤细胞融合制备抗CSFV单克隆抗体,经过多轮亚克隆和免疫过氧化物酶单层试验(IPMA)筛选,成功获得5D1、8H7、9A1和13B2共4株能够稳定分泌抗CSFV单克隆抗体的杂交瘤细胞株。4株单克隆抗体轻链均属于κ型,其中5D1、8H7、13B2为IgG1亚型,9A1为IgG2c亚型。间接ELISA检测结果显示,4株单克隆抗体的腹水效价在2.56×10^5~1.02×10^6;IPMA效价分别为6.40×10^4、1.28×10^5、2.56×10^5、1.28×10^5;SDS-PAGE和Western blot检测结果显示,4株单克隆抗体均能与经原核表达系统及杆状病毒表达系统获得的CSFV E2蛋白发生特异性反应;IPMA检测结果显示,4株单克隆抗体均能与CSFV发生特异性反应,而与牛流行性腹泻病毒(BVDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒(PCV2)均无交叉反应。病毒中和试验证实,单克隆抗体13B2具有中和活性,其中和效价为1.28×10^4。综上,成功筛选出4株能够分泌抗CSFV特异性抗体的杂交瘤细胞株,其中单克隆抗体13B2具有中和CSFV感染活性。

关 键 词：猪瘟病毒 E2蛋白 中和性单克隆抗体 抗体中和效价  免疫过氧化物酶单层细胞试验  

分 类 号：S855.3]