文献类型：期刊文章

作　　者：苗双[1] 丁国建[2] 宋殿芳[3] 张传厚[3] 刘乃国[4] 董洪亮[4]

MIAO Shuang;DING Guo-jian;SONG Dian-fang;ZHANG Chuan-hou;LIU Nai-guo;DONG Hong-liang(Cancer Research Center,Binzhou Medical University Hospital,Binzhou 256603,Shangdong,China;Pediatric Surgery,Binzhou Medical University Hospital,Binzhou 256603,Shangdong,China;Obstetrics and Gynecology,Binzhou Medical University Hospital,Binzhou 256603,Shangdong,China;Clinical Medical Laboratory,Binzhou Medical University Hospital,Binzhou 256603,Shangdong,China)

机构地区：[1]滨州医学院附属医院肿瘤研究实验室,山东256603 [2]滨州医学院附属医院儿外科,山东256603 [3]滨州医学院附属医院妇产科,山东256603 [4]滨州医学院附属医院临床医学实验室,山东256603

出　　处：《医学研究生学报》

基　　金：山东省医药卫生科技发展计划项目(2017WS548)

年　　份：2019

卷　　号：32

期　　号：10

起止页码：1025-1030

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、IC、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的特发性肺纤维化(IPF)确切的发病机制尚不明确。探讨IPF中细胞自噬对上皮细胞间充质转化过程(EMT)的调控作用及机制。方法实验分为对照组、肺纤维化组、自噬诱导组、自噬抑制组。对照组细胞(A549)常规培养,肺纤维化组、自噬诱导组、自噬抑制组细胞(A549)均加入5 ng/mL的TGF-β1进行诱导,肺纤维化组不做进一步处理,自噬诱导组、自噬抑制组分别加入终浓度10μg/L Rapamycin、10 mmol/L 3-Methyladenine来诱导或抑制细胞自噬;12、24、48 h,检测各组羟脯氨酸含量,Real-time PCR方法及Western blot方法检测各组α-肌动蛋白(α-SMA),α-SMA、LC3-Ⅱ或LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、Vimentin的mRNA转录及蛋白表达水平。结果与对照组比较,肺纤维化组、自噬诱导组、自噬抑制组12、24、48 h羟脯氨酸含量、α-SMA、Vimentin的mRNA转录水均升高(P<0.05),Beclin1、LC3-Ⅱ、E-cadherin的mRNA转录均降低(P<0.05)。与肺纤维化组比较,自噬诱导组在12、24、48 h羟脯氨酸含量、α-SMA、Vimentin的mRNA转录水平降低(P<0.05),Beclin1、LC3-Ⅱ、E-cadherin的mRNA转录水平升高(P<0.05);而自噬抑制组12、24、48 hα-SMA、Vimentin的mRNA转录水均升高(P<0.05),Beclin1、LC3-Ⅱ、E-cadherin的mRNA转录水均降低(P<0.05)。Western blot检测结果表明,与对照组24 hα-SMA(1.21±0.17)比较,肺纤维化组(2.57±0.34)、自噬诱导组(1.69±0.31)、自噬抑制组(3.41±0.52)表达水均明显升高(P<0.05);与对照组24 h Vimentin的蛋白表达水平(0.27±0.07)比较,肺纤维化组(1.74±0.31)、自噬诱导组(1.03±0.25)、自噬抑制组(2.43±0.61)表达水均明显升高(P<0.05)。对照组、肺纤维化组、自噬诱导组、自噬抑制组Beclin1的表达分别为2.31±0.31、0.54±0.29、0.91±0.23、0.28±0.07,E-cadherin的表达分别为3.07±0.41、0.74±0.35、1.21±0.51、0.35±0.07,LC3-Ⅱ的表达分别1.15±0.14、0.53±0.11、0.76±0.09和0.17±0.08,以上数据提示Beclin

关 键 词：特发性肺纤维化 A549细胞 细胞自噬 上皮细胞间充质转化  

分 类 号：R563]