文献类型：期刊文章

作　　者：朱艳平[1] 何勇[1] 刘佳[1,2] 邢瑞林[1] 常乐凯[1] 李润芷[1,3] 岳锋[1] 吴玉苹[1] 李鹏[1] 孙国鹏[1] 张艳芳[1] 王选年[1,2,3]

ZHU Yanping;HE Yong;LIU Jia;XING Ruilin;CHANG Lekai;LI Runzhi;YUE Feng;WU Yuping;LI Peng;SUN Guopeng;ZHANG Yanfang;WAGN Xuannian(Center for Biotechnology Research,College of Life Science and Technology,Xinxiang University,Xinxiang 453003,China;School of Life Science,Zhengzhou University,Zhengzhou 450000,China;College of Animal Sciences,Henan Institute of Science and Technology,Xinxiang 453003,China)

机构地区：[1]新乡学院生命科学技术学院生物技术研究中心,新乡453003 [2]郑州大学生命科学技术学院,郑州450000 [3]河南科技学院动物科学学院,新乡453003

出　　处：《中国畜牧兽医》

基　　金：河南省科技攻关项目(182102110221);新乡学院青年骨干教师资助计划项目(GGJS2016-06);新乡学院科技创新团队项目(XXUTD20170106);河南省教育厅自然科学重点研究项目(19A230009)

年　　份：2019

卷　　号：46

期　　号：10

起止页码：2860-2866

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：为获得高活性的鸡传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)VP2蛋白的重组蛋白,本试验对IBDV VP2蛋白基因与能进行自我组装的幽门螺杆菌(Hp)铁蛋白基因进行融合PCR扩增,获得其融合基因。根据成熟VP2蛋白基因cDNA序列和Hp铁蛋白基因的碱基序列,设计合成2对引物,应用融合PCR技术扩增获得融合基因片段VP2-Fe。将目的基因克隆至pMD18-T载体筛选阳性重组克隆质粒,然后将目的基因亚克隆至真核表达载体pPICZaC后转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选获得阳性表达质粒。结果显示,通过两轮PCR扩增出长度为1 824 bp的融合基因VP2-Fe,亚克隆至pMD18-T载体,测序结果显示,融合基因无任何碱基的突变,筛选的阳性质粒命名为pMD-VP2-Fe。双酶切回收目的基因大小为1 824 bp,亚克隆至pPICZaC,PCR和双酶切鉴定出现预期大小的片段,将获得的阳性表达质粒命名为pPICZaC-VP2-Fe。本研究为后期利用真核表达载体获得其融合重组蛋白奠定基础。

关 键 词：传染性法氏囊病病毒(IBDV)  VP  2基因  幽门螺杆菌 铁蛋白 融合PCR

分 类 号：S852.4]