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辣椒疫霉菌葡聚糖酶抑制蛋白的原核表达、纯化及结晶
Prokaryotic Expression, Purification and Crystallization of Glucanase Inhibitor Protein (GIP) from Phytophthora capsica
文献类型:期刊文章
Wang Huizheng;Lan Yubin(College of Agricultural Engineering and Food Science,Shandong University of Technology/National Sub-centerfor International Collaboration Research on Precision Agricultural Aviation Pesticide Spraying Technology,Zibo 255000,China)
机构地区:[1]山东理工大学农业工程与食品科学学院/国家精准农业航空施药技术国际联合研究中心山东理工大学分中心
基 金:山东省引进顶尖人才“一事一议”专项经费资助项目;淄博市科技发展计划资助项目(2018kj010073)
年 份:2019
卷 号:51
期 号:10
起止页码:111-116
语 种:中文
收录情况:JST、ZGKJHX、普通刊
摘 要:葡聚糖酶抑制蛋白(GIP)是辣椒疫霉菌在病理环境下诱导产生的一类蛋白,是病原菌抗性蛋白的一种。本研究根据辣椒疫霉菌全基因组序列,通过生物信息学分析、序列比对获得葡聚糖酶抑制蛋白全长基因序列。以辣椒疫霉高致病菌株SD33全基因组为模板扩增GIP基因cDNA,并对其进行相关生物信息学分析。基因经测序验证后与载体pET28a(+)连接,构建好的重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli Rosetta),用IPTG诱导表达重组蛋白6×His-GIP。重组蛋白在5mol/L尿素变性环境下进行亲和层析纯化,对纯蛋白进行透析、复性、浓缩后进行分子排阻层析纯化,并对获得的纯蛋白进行蛋白结晶试验,为进一步阐明GIP作用机理奠定基础。
关 键 词:辣椒疫霉菌 葡聚糖酶抑制蛋白(GIP) 原核表达 纯化 结晶
分 类 号:S432.44] Q78]
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