文献类型：期刊文章

作　　者：布日额[1] 吴金花[1] 锡林高娃[1] 孙立杰[1]

BU Ri-e;WU Jin-hua;XI Lin gao-wa;SUN Li-jie(Research Institute for Pathogens in Milk,Inner Mongolia University for Nationalities,Tongliao,Inner Mongolia,China028043)

机构地区：[1]内蒙古民族大学生命科学学院内蒙古自治区乳源性致病菌防控工程技术研究中心内蒙古民族大学乳源性致病菌研究所

出　　处：《中国病原生物学杂志》

基　　金：国家自然科学基金项目(No.31760725);内蒙古自治区乳源性致病菌防控工程技术研究中心开放课题(No.MDK2018001,MDK2018002)

年　　份：2019

卷　　号：14

期　　号：7

起止页码：773-779

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CSCD、CSCD2019_2020、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的构建牛乳腺炎无乳链球菌cylE基因缺失突变菌株,为进一步开展其致病机制与免疫机制研究奠定实验基础。 方法参考GenBank上公布的无乳链球菌cylE基因上、下游序列(AF157015.2),利用primer 5.0生物信息软件设计扩增引物,经PCR扩增出cylE基因上游序列L、下游序列R,并根据pACYC184质粒氯霉素抗性基因cat r序列设计引物,扩增cat r基因片段C,依次将L、R和C片段克隆至温敏型自杀质粒pSET4S中,构建cylE基因缺失重组质粒pSET4S-LCR,通过电转化技术将其转化至无乳链球菌,通过温度和抗生素抗性筛选cylE缺失突变株。 结果经PCR和溶血表型鉴定结果表明,成功获得1株牛乳腺炎无乳链球菌β溶血素cylE基因缺失突变菌株。 结论为进一步研究其致病机制与免疫机制奠定了良好的研究基础。

关 键 词：无乳链球菌 溶血素 基因敲除

分 类 号：R383.15]