文献类型：期刊文章

作　　者：李双[1] 向涛[1] 周海峰[1] 吴霆[1,2] 顾伟[1] 王文[1] 孟庆国[1]

Li Shuang

机构地区：[1]南京师范大学生命科学学院/江苏省水生甲壳动物病害重点实验室,江苏南京210023 [2]江苏省宝应县水生动物疫病预防控制中心,江苏宝应225800

出　　处：《江苏农业科学》

基　　金：渔业重大技术集成与示范推广项目(编号:D2015-13-5)

年　　份：2019

卷　　号：47

期　　号：14

起止页码：62-65

语　　种：中文

收录情况：JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：异育银鲫作为我国重要的淡水经济鱼类,其鳃出血病为主要病害,并造成重大经济损失,该病病原为鲤疱疹病毒Ⅱ型(cyprinid herpesvirus Ⅱ,CyHV-2).目前,研究主要在该病的检测和病理方面,对于免疫学检测方面研究较少.本研究根据CyHV-2ORF72基因序列设计了1对特异性引物,利用患病异育银鲫肾脏DNA作为模板,通过PCR扩增得到CyHV-2ORF72基因全长,该基因序列全长为1113bp,可编码370个氨基酸的蛋白.该基因与pET-28a表达载体连接构建重组原核表达载体pET-ORF72转入大肠杆菌中,经IPTG诱导表达得到了分子量约为45ku的重组蛋白,与预测的蛋白大小基本一致.将纯化的重组蛋白皮下多点注射免疫新西兰大耳兔制备了ORF72的多克隆抗体,经Western Blotting检测抗体能与病毒粗提液有良好反应,特异性较好,本结果可为下一步建立疫苗和免疫检测方法奠定基础.

关 键 词：异育银鲫 鲤疱疹病毒Ⅱ型  ORF72  多克隆抗体 WESTERN BLOTTING

分 类 号：S941.41]