文献类型：期刊文章

作　　者：孙健[1] 孙婷婷[2] 王旭彤[1] 邹莉[1]

SUN Jian;SUN Tingting;WANG Xutong;ZOU Li(School of Forestry Northeast Forestry University,Harbin 150040,China;Department of Food Engineering,Harbin University,Harbin 150086,China)

机构地区：[1]东北林业大学林学院,哈尔滨150040 [2]哈尔滨学院食品工程学院,哈尔滨150086

出　　处：《吉林农业大学学报》

基　　金：中央高校基本科研业务费专项资金项目(2572017CF01)

年　　份：2019

卷　　号：41

期　　号：3

起止页码：308-315

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2019_2020、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：克隆了黑木耳(Auricularia auricular-judae)内切葡聚糖酶(endoglucanase)基因并进行序列分析,此外,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达。研究基于前期测得的黑木耳转录组数据,同时结合基因组数据(GenBank登录号为NEKD00000000.1),筛选到黑木耳内切葡聚糖酶基因序列并设计特异引物,以黑木耳菌丝总RNA为模板,采用RT-PCR技术克隆黑木耳内切葡聚糖酶基因cDNA全长,命名为Aa-eg,构建了重组原核表达载体pET32a-Aa-eg并成功在大肠杆菌中表达。序列分析表明,cDNA全长为1242bp,编码413个氨基酸,预测该蛋白分子量为43.59ku,理论等电点为4.42,存在信号肽。由于pET-32a载体包含20.0ku的标签,SDS-PAGE分析在45.0ku和66.2ku之间出现目的蛋白条带,与理论预期值大小一致。通过对黑木耳内切葡聚糖酶基因的克隆及分析,为进一步揭示黑木耳内切葡聚糖酶基因功能奠定基础。

关 键 词：黑木耳 内切葡聚糖酶 基因克隆  生物信息学分析 原核表达

分 类 号：S646.6] Q78]