期刊文章详细信息
PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV多重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用
Establishment and application of multiplex TaqMan real-time RT-PCR for differential detection of PEDV, TGEV,PDCoV and PRoV
文献类型:期刊文章
SHI Kai-chuang;WANG Rui-min;LI Zong-qiang;XIE Shou-yu;YIN Yan-wen;LU Wen-jun;QU Su-jie(Guangxi Center for Animal Disease Control and Prevention,Nanning 530001,China;College of Animal Science and Technology,Guangxi University,Nanning 530005,China)
机构地区:[1]广西动物疫病预防控制中心,广西南宁530001 [2]广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005
基 金:广西水产畜牧科技项目(桂渔牧科201528017);广西科技重大专项(桂科AA17204057);广西农业科技项目(Z201954)
年 份:2019
卷 号:41
期 号:6
起止页码:595-600
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSCD、CSCD_E2019_2020、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:为建立鉴别检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和猪轮状病毒(PRoV)的方法,本研究分别针对PEDVN基因、TGEVM基因、PDCoVM基因和PRoVVP6基因设计特异性引物和TaqMan探针,经过优化反应条件,建立了同时检测4种病毒的多重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法仅特异性扩增PEDV、TGEV、PDCoV和PRoV,与猪其它主要病毒无交叉反应,特异性较强;对PEDV、TGEV、PDCoV和PRoV的质粒标准品的最低检出限分别为2.06×10^2拷贝/μL、2.06×10^2拷贝/μL、2.06×10^1拷贝/μL、2.06×10^3拷贝/μL,具有较高敏感性;组内与组间变异系数均小于1.1%,具有良好的重复性。应用该方法和普通多重RT-PCR检测临床采集的243份腹泻病料样品,两者的符合率为96.71%。本研究建立的方法为临床PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV的鉴别检测及流行病学调查提供了一种快速、特异、敏感、高效的技术手段。
关 键 词:猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪德尔塔冠状病毒 猪轮状病毒 荧光定量RT-PCR
分 类 号:S852.65]
参考文献:
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