期刊文章详细信息
猪瘟病毒重组酶聚合酶扩增检测方法的建立及应用
Rapid and simple detection of classical swine fever virus by reverse transcription recombinase polymerase amplification assay
文献类型:期刊文章
WANG Jin-feng;ZHANG Ruo-xi;LIU Li-bing;LI Rui-wen;MENG Ling-zhai;GU Wen-yuan;HAN Qing-an;WANG Jian-chang;YUAN Wan-zhe(Hebei Academy of Science and Technology for Inspection and Quarantine ,Shijiazhuang 050051, China;Center for Animal Disease Prevention and Control of Hebei Province, Shijiazhuang 050035, China;College of Veterinary Medicine ,Hebei A gricultural University, Baoding 071001, China;Technology Center of Shijiazhuang Customs ,Shijiazhuang 050051, China)
机构地区:[1]河北省检验检疫科学技术研究院,河北石家庄050051 [2]河北省动物疫病预防控制中心,河北石家庄050035 [3]河北农业大学动物医学院,河北保定071001 [4]石家庄海关技术中心,河北石家庄050051
基 金:河北省自然科学基金项目(C2017325001);河北省科技攻关计划项目(16226604D);河北省高校百名优秀人才支持计划项目(SLRC2017039)
年 份:2019
卷 号:49
期 号:6
起止页码:687-693
语 种:中文
收录情况:AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2019_2020、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊
摘 要:本研究基于猪瘟病毒(CSFV)5’UTR保守序列,设计特异性引物,建立了可快速检测CSFV的反转录重组酶聚合酶扩增检测方法(reverse-transcription recombinase polymerase amplification,RT-RPA)。该方法在40℃下恒温20 min即可完成反应;且特异性强,与其他瘟病毒和猪的重要病原无任何交叉反应。以体外转录的CSFV RNA为模板,该方法的检出下限为10~2copies。采用RT-RPA方法和实时荧光RT-PCR(real-time RT-PCR)方法同时对57份临床样品进行CSFV检测,结果,RT-RPA方法的阳性检出率为56.14%(32/57),略低于real-time RT-PCR方法的阳性检出率(64.19%,37/57)。以real-time RT-PCR作为参考方法,所建立的RT-RPA方法的诊断特异性为100%,诊断灵敏度为89.19%。上述结果表明,本研究建立的CSFV RT-RPA检测方法操作简单、反应快速,对没有装备荧光PCR仪地区的猪瘟诊断防控具有重要意义。
关 键 词:猪瘟病毒 5’UTR RT-RPA 等温扩增
分 类 号:S852.659.6]
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