文献类型：期刊文章

作　　者：张亚茹[1] 闫海强[2] 杨最素[1] 余方苗[1] 丁国芳[1,3] 龚戬芳[2]

ZHANG Yaru;YAN Haiqiang;YANG Zuisu;YU Fangmiao;DING Guofang;GONG Jianfang(Zhejiang Provincial Engineering Technology Research Center of Marine Biomedical Products, School of Food Science andPharmacy, Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316022, China;College of Donghai Science and Technology, Zhejiang Ocean University, Zhoushan 316004, China;Marine Fisheries Research Institute of Zhejiang, Zhoushan 316022, China)

机构地区：[1]浙江海洋大学食品与医药学院,浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心,浙江舟山316022 [2]浙江海洋大学东海科学技术学院,浙江舟山316004 [3]浙江省海洋水产研究所,浙江舟山316022

出　　处：《食品科学》

基　　金：浙江省自然科学基金项目(LY12C20005;LY12C20008);舟山市级公益类科技项目(2015C31012)

年　　份：2019

卷　　号：40

期　　号：11

起止页码：167-174

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD_E2019_2020、EI、FSTA、IC、JST、RCCSE、RSC、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：探讨青蛤多肽的制备工艺及体外抗前列腺癌DU-145细胞的活性。以氨基氮含量为检测指标,筛选最优酶种类并进行正交试验以获取最佳酶解青蛤内脏酶解工艺。经超滤截留、琼脂糖凝胶层析、高效液相色谱分离纯化及噻唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)活性筛选得到含有5个氨基酸的多肽(Ile-Leu-Tyr-Met-Pro)。对所得多肽采用MTT法测定DU-145细胞增殖抑制率;采用倒置显微镜、Hoechst 33258染色及透射电子显微镜技术观察细胞形态学变化;采用荧光法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用线粒体膜电位检测DU-145细胞凋亡情况;采用免疫组织化学法检测非转移性克隆23型(nm23H1)蛋白的表达。结果表明:制备青蛤多肽最佳酶是木瓜蛋白酶,最佳酶解条件是料液比1:4、pH 7.0、加酶量1 500 U/g、温度45.0℃、酶解时间4 h;所得多肽对DU-145细胞的增殖具有明显的抑制作用,且呈时间与剂量依赖性;处理后的DU-145细胞出现凋亡的形态学特征;其质量浓度和细胞内ROS的表达量呈正相关关系;线粒体膜电位降低率从4.22%提高到25.07%;免疫组织化学法结果显示nm23H1蛋白的表达量增加。青蛤多肽能明显抑制DU-145细胞的增殖,并通过诱导其发生凋亡而发挥作用。

关 键 词：青蛤 酶解 前列腺癌 细胞凋亡  

分 类 号：TS201.4] R734.2[食品科学与工程类]