文献类型：期刊文章

作　　者：张腾松[1] 孙乔[2] 邸洁[2] 王可可[1] 曲彦[1]

Zhang Tengsong;Sun Qiao;Di Jie;Wang Keke;Qu Yan(Department of Intensive Care Unit,Affiliated Qingdao Municipal Hospital of Qingdao University,Qingdao 266071,Shandong,China;School of Nursing,Medical College of Qingdao University,Qingdao 266023,Shandong,China)

机构地区：[1]青岛大学附属青岛市市立医院重症医学科,山东青岛266071 [2]青岛大学医学部护理学院,山东青岛266023

出　　处：《中华危重病急救医学》

基　　金：山东省自然科学基金(ZR2013HM109).

年　　份：2019

卷　　号：31

期　　号：4

起止页码：464-467

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、JST、PUBMED、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨不同浓度不同作用时间下脂多糖(LPS)对A549细胞炎性因子基因表达的影响,为进一步确立急性呼吸窘迫综合征(ARDS)细胞模型的最适浓度-时间条件奠定基础。方法取A549细胞,用含10%胎牛血清的高糖DMEM培养基于37?℃、5%CO2培养箱常规培养,取对数生长期的A549细胞进行传代,计数细胞并调整细胞密度为(5~7)×105个,于6孔板中培养2d,当细胞融合至50%~60%时换无血清培养基DMEM培养12h。取10mgLPS加入10mLDMEM培养基振荡混匀,配制1g/L储存液;取0.5、1.0、2.5mL的LPS储存液用DMEM溶液稀释定容至50mL,配制成0、10、20、50mg/L的LPS工作液。然后以0、10、20、50mg/L的LPS分别作用0、1、3、5h,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞白细胞介素(IL-6、IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达,以10mg/L的LPS作用0h为时间对照组,以0mg/L的LPS作用1h为浓度对照组,采用2^-ΔΔCt法计算基因表达量。结果①时间因素方面,在相同LPS浓度作用下,A549细胞经10mg/L的LPS作用1h时IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平均明显高于0h时〔IL-6mRNA(2^-ΔΔCt):5.71±0.42比1.00±0.00,IL-1βmRNA(2^-ΔΔCt):5.63±0.30比1.00±0.00,TNF-αmRNA(2^-ΔΔCt):5.38±0.61比1.00±0.00,均P<0.01〕,其他时间点间细胞炎性因子基因表达水平均无明显改变。②浓度因素方面,在相同作用时间下,A549细胞经10mg/L的LPS作用1h时IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平均明显高于0mg/L的LPS作用1h时〔IL-6mRNA(2^-ΔΔCt):5.70±0.64比1.00±0.00,IL-1βmRNA(2^-ΔΔCt):6.25±0.25比1.00±0.00,TNF-αmRNA(2^-ΔΔCt):5.57±0.25比1.00±0.00,均P<0.01〕,其他浓度LPS组间炎性因子基因表达水平均无明显改变。结论10mg/L的LPS作用A549细胞1h为建立ARDS细胞模型的最适作用浓度-时间条件。

关 键 词：脂多糖 A549细胞 炎性因子 基因表达

分 类 号：R563.8]