文献类型：期刊文章

作　　者：王金英[1] 曹帅[1] 党江波[1] 梁国鲁[1] 杨超[2] 张艳[2] 陈益银[2]

WANG Jinying;CAO Shuai;DANG Jiangbo;LIANG Guolu;YANG Chao;ZHANG Yan;CHEN Yiyin(College of horticulture and landscape, Southwest University, Chongqing 400716, China;Chongqing Tobacco Research Institute, Chongqing Municipal Tobacco Company, Chongqing 400716, China)

机构地区：[1]西南大学,园艺园林学院,重庆北碚区天生街2号400716 [2]中国烟草总公司重庆市公司,烟草科学研究所,重庆市北碚区天生路2号400716

出　　处：《中国烟草学报》

基　　金：中国烟草总公司重庆市公司科技项目"重庆烟草自育烤烟新品系深化培育与示范"(NY20170401070001)

年　　份：2019

卷　　号：25

期　　号：2

起止页码：78-84

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、DOAJ、EI、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)在细胞遗传学中有较多应用,其中重复序列常被作为探针来研究物种进化、分类。但现常用的探针序列均较长(200 bp-500 bp),杂交耗时较多。本研究以烟草(Nictiana tabacum)为材料,克隆并标记18S rDNA保守序列(254 bp),以其为探针对烟草染色体进行FISH,经18 h杂交获得了清晰的信号。在此基础上,利用荧光素直接标记引物序列(寡聚核苷酸),经较短时间(2 h)的杂交,也获得了清晰的信号。以寡聚核苷酸为探针对云烟87四倍体、N. tabacum-N. plumbaginifolia五倍体、烟草六倍体、云烟87八倍体以及N. plumbaginifolia的染色体进行杂交,均获得了良好效果。且杂交液可简化配制,洗脱过程也可简化。18S rDNA寡聚核苷酸探针与5S rDNA寡聚核苷酸探针结合,实现了N. plumbaginifolia的18S rDNA和5S rDNA双色FISH。所以,该寡聚核苷酸序列可以应用于烟草属植物18S rDNA(45S rDNA)位点的分析,且较大程度缩短了操作时间并简化了操作过程。

关 键 词：烟草 18S  RDNA 探针 FISH 5S  RDNA

分 类 号：S572]