文献类型：期刊文章

作　　者：聂福平[1,2] 孟向阁[2,3] 王昱[1] 杨俊[1] 李贤良[1] 王国民[1] 韩雪清[4] 李应国[1] 侯长军[2]

NIE Fu-ping;MENG Xiang-ge;WANG Yu;YANG Jun;LI Xian-liang;WANG Guo-min;HAN Xue-qing;LI Ying-guo;HOU Chang-jun(Inspection and Quarantine Technology Center,Chongqing Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau of China、Engineering Center for the Research of Imported Terrestrial Animal Disease Prevention and Control in Chongqing、State KeyLaboratory of Bovine Diseases,Chongqing 400020;College of Bioengineering,Chongqing University,Chongqing 400030;College of Animal Science and Technology,Southwest University,Chongqing 400715;China Academy of Inspection and Quarantine,Beijing 100176)

机构地区：[1]重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心/重庆市陆生动物疫病防控技术研究工程中心/牛病检测重点实验室,重庆400020 [2]重庆大学生物工程学院,重庆400030 [3]西南大学动物科技学院,重庆400715 [4]中国检验检疫科学研究院,北京100176

出　　处：《中国兽医科学》

基　　金：国家"十三五"科研项目(2016YFD0500907-X);国家质检公益性项目(201310093);重庆出入境检验检疫局科技自立项目(2017CQIK01)

年　　份：2019

卷　　号：49

期　　号：4

起止页码：403-409

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD_E2019_2020、IC、JST、RCCSE、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：为鉴别牛结节性皮肤病病毒野毒株(wild type lumpy skin disease virus,WT LSDV),本研究根据GenBank中发表的WT LSDV全基因组序列,设计并合成1对特异性引物和MGB探针,优化反应条件,建立了鉴别检测WT LSDV的TaqMan-MGB荧光定量PCR方法。结果显示,该方法仅对WT LSDV核酸有特异性扩增,对LSDV疫苗株等其他病毒核酸无交叉反应;标准曲线在一定浓度范围内呈现良好的线性关系,标准曲线为y=-3.361 x+34.979,R^2>0.999,扩增效率为98.39%,最低检测限为4.6 copies/μL。组内、组间重复性试验的变异系数均小于3%。对63份模拟临床样品的检测结果显示,本研究建立荧光定量PCR方法的阳性检出率为90.57%,OIE推荐的普通PCR方法的阳性检出率为64.15%,两种方法检测临床样品均为WT LSDV核酸阴性。结果表明,建立的WT LSDV TaqMan-MGB荧光定量PCR方法特异、敏感、快速、重复性好,且能快速准确地检测WT LSDV,适用于临床样品的鉴别检测,为该病的鉴别、监测、防控提供了技术支撑。

关 键 词：牛结节性皮肤病病毒野毒株  荧光定量PCR TaqMan-MGB  

分 类 号：S852.659.1]