文献类型：期刊文章

作　　者：陈萌[1] 杜超[2] 田焕娜[3] 王爱乐[4] 夏晓晓[5]

CHEN Meng;DU Chao;TIAN Huan-na;WANG Ai-le;XIA Xiao-xiao(Department of Electron Microscope,Chengde Medical College,Hebei Chengde 067000,China;Department of Biochemistry,Chengde Medical College,Hebei Chengde 067000,China;Institute of Basic Medical Sciences,College,Hebei Chengde 067000,China;ICU Room of Chengde Traditional Chinese Medicine Hospital,Hebei Chengde 067000,China;Grade 2016 Undergraduate Medical Student,Chengde Medical College,Hebei Chengde 067000,China)

机构地区：[1]承德医学院基础医学院电子显微镜室 [2]承德医学院基础医学院生物化学教研室 [3]承德医学院基础医学院基础医学研究所 [4]承德市中医院ICU室 [5]承德医学院

出　　处：《解剖学报》

基　　金：河北省自然科学青年基金(H2015406046);河北省卫生计生委项目(20181145);承德医学院大学生科研项目(201728)

年　　份：2019

卷　　号：50

期　　号：2

起止页码：158-165

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、EMBASE、IC、JST、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：目的应用不同浓度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)干预脑缺血再灌注大鼠,检测热休克蛋白70(HSP70)和微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白的表达,观察其对神经元超微结构的影响。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分成5组:假手术组(sham)、缺血再灌注组(IR),Cys C低浓度组(Cys C1)、Cys C中浓度组(Cys C2)、Cys C高浓度组(Cys C3),每组12只。采用线栓法制备脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h再灌注24 h后进行改良神经功能损伤严重程度评分(m NSS)。Western blotting半定量检测损伤中心脑皮质组织中HSP70、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达;免疫组织化学法检测HSP70、LC3的阳性细胞个数;免疫荧光双标记法检测皮质神经元自噬相关蛋白LC3和神经元核抗原(Neu N)共染的阳性细胞平均吸光度值;透射电子显微镜下观察神经元超微结构的变化。结果与IR组相比,Cys C1、Cys C2组m NSS评分明显减少(P<0. 05),HSP70的表达较IR组明显升高(P<0. 01);而Cys C3组m NSS评分升高,与IR组差别无显著性(P>0. 05); Cys C3组HSP70的表达明显降低(P<0. 01); Cys C各浓度组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达有不同程度的升高(P<0. 01); LC3和Neu N共染阳性细胞平均吸光度逐渐增强(P<0. 05);透射电子显微镜结果显示,Cys C1、Cys C2组神经细胞的超微结构有所改善,而Cys C3组脑皮质神经细胞损伤较重。结论 Cys C可能在一定浓度范围内对缺血再灌注损伤神经细胞有保护作用。浓度过高则导致神经细胞自噬性死亡。

关 键 词：脑缺血再灌注  自噬  热休克蛋白70  微管相关蛋白轻链3  免疫印迹法  免疫荧光  大鼠  

分 类 号：R743.31]