文献类型：期刊文章

作　　者：徐赐栋[1,2] 邹建文[1,2] 李军[3] 吴基良[1] 张开泰[4] 阎蓓[3] 刘滨磊[1,2]

XU Ci-dong;Z0U Jian-wen;LIU Bin-lei(School of Pharmacy, Hubei University of Science and Technology ,Xianning Hubei 431100, China)

机构地区：[1]湖北科技学院药学院,湖北咸宁437100 [2]武汉滨会生物科技股份有限公司 [3]武汉大学附属同仁医院 [4]中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院病因及癌变研究室

出　　处：《湖北科技学院学报（医学版）》

年　　份：2019

卷　　号：33

期　　号：2

起止页码：99-101

语　　种：中文

收录情况：普通刊

摘　　要：目的构建新的含有表达绿色荧光蛋白(GFP)的单纯疱疹病毒(OHSV2-GFP),初步验证其对循环肿瘤细胞特异性示踪作用。方法采用PCR、分子克隆及同源重组技术,从HG52野生病毒株的基因组中剔除ICP34.5基因并插入GFP表达序列,构建OHSV2-GFP。抽取健康志愿者外周血4mL,将Hela细胞按10、100、500个加入外周血中后,按照MOI=1比例转染重组病毒OHSV2-GFP^+,然后用流式细胞仪进行该方法检出率测定;收集40例正常人、15例宫颈炎患者和20例宫颈癌患者外周血4mL,裂解去除红细胞后,按照MOI=1的比例转染重组病毒OHSV2-GFP^+,24h后收集细胞,流式细胞仪检测CD45^+/GFP^-细胞并计数,初步检测该方法临床应用的可行性。结果将Hela细胞按10、100、500个加入外周血中后,检测结果显示,检出数分别为6.3、61.7、300.5,总体检出率为61.7%,线性回归分析显示应用此方法捕获的CTC数量与预先加的肿瘤细胞数呈线性关系,R^2≥0.95。宫颈癌患者的GFP^+/CD45^-细胞数(10.90±2.3)个明显高于正常人(0.38±0.12)和宫颈炎患者(0.33±0.09)个,差异具有显著性(P<0.01)。结论本研究应用循环肿瘤细胞能够被该重组病毒捕获的特性,建立一种新的CTCs检测技术,并针对此技术的可靠性进行了证实,为进一步的临床应用研究打下了基础。

关 键 词：宫颈癌 循环肿瘤细胞 单纯疱疹病毒

分 类 号：R737.33]