文献类型：期刊文章

作　　者：蒋鼎[1,2] 丁道芳[3] 韩大鹏[4] 翟伟韬[4] 欧阳桂林[4] 薛艳[2] 薛乔[5] 曹月龙[2]

JIANG Ding;DING Dao-Fang;HAN Da-Peng;ZHAI Wei-Tao;OUYANG Gui-Lin;XUE Yan;XUE Qiao;CAO Yue-Long(Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai 201203,China;Orthopedics Institute of Affiliated Shuguang Hospital to Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai 201203,China;Rehabilitation School,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai 201203,China;Guanghua Arthrophlogosis Institute,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai 200052,China;Tibetan Qizheng Medicine Limited Liability Company,Tibet 860000,China)

机构地区：[1]上海中医药大学,上海201203 [2]上海中医药大学附属曙光医院骨伤研究所,上海201203 [3]上海中医药大学康复学院,上海201203 [4]上海中医药研究院光华关节炎研究所,上海200052 [5]西藏奇正藏药股份有限公司,西藏860000

出　　处：《广州中医药大学学报》

基　　金：国家自然科学基金资助项目(编号:81373665);上海中医药大学高峰高原团队建设项目

年　　份：2019

卷　　号：36

期　　号：4

起止页码：556-562

语　　种：中文

收录情况：CAS、CSA、CSA-PROQEUST、JST、RCCSE、UPD、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：【目的】观察白脉软膏含药血浆对大鼠退变滑膜细胞和软骨细胞共培养体系的干预作用,并从"滑膜—软骨"轴角度探讨骨关节炎(OA)的发病机制。【方法】取新生SD大鼠膝关节滑膜,经消化酶消化后获得原代滑膜细胞,取第1代(P1)细胞进行实验。实验设空白组、模型组、西药组、白脉组。模型组加入脂多糖(LPS)进行诱导,西药组与白脉组在模型组LPS诱导的基础上分别加入扶他林软膏、白脉软膏含药血浆干预。LPS诱导24 h后观察滑膜细胞形态变化,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测滑膜细胞上清中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。此后,各组皆与正常软骨细胞进行共培养。共培养24 h后观察软骨细胞形态,实时定量PCR(qPCR)检测软骨细胞基质金属蛋白酶3(MMP3)、带有血小板凝血酶敏感蛋白样模体的解整链蛋白金属蛋白酶4(ADAMTS4)、TNF-α、性别决定区Y框蛋白9(Sox9)mRNA表达情况,Westernblot法检测Ⅱ型胶原蛋白(COL2A1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、磷酸化核因子κBp65(p-NF-κBp65)表达情况。【结果】LPS诱导后滑膜细胞形态由原来的多角形变成长梭形。ELISA结果显示,模型组滑膜细胞上清中IL-1β、TNF-α含量较空白组升高(P <0.05),而白脉组IL-1β、TNF-α含量较模型组下降。软骨细胞与退变滑膜细胞培养24 h后由原来的多角形变为长梭形。qPCR结果显示:与空白组比较,模型组软骨细胞MMP3、ADAMTS4、TNF-αmRNA表达升高(P <0.05),Sox9mRNA表达降低(P <0.05);与模型组比较,白脉组软骨细胞MMP3、TNF-α、ADAMTS4 mRNA表达明显降低(P <0.05),Sox9 mRNA表达水平升高(P <0.05)。Western blot结果显示:与空白组比较,模型组软骨细胞MMP13、p-NF-κBp65表达升高(P <0.05),COL2A1表达明显降低(P <0.05);与模型组比较,白脉组软骨细胞MMP13、p-NF-κBp65表达降低(P <0.05),COL2A1表达升高(P <0.05)。【结论】退变滑膜细胞可导致软骨细胞退变并

关 键 词：白脉软膏  软骨退变 滑膜炎 骨关节炎  细胞培养  

分 类 号：R285.5[中药学类]