期刊文章详细信息
Wnt/β-catenin信号通路对小鼠海马神经干细胞的影响
Effect of Wnt/β-catenin signaling pathway on neural stem cells of hippocampus in mice
文献类型:期刊文章
Zhang Xianhu;Zhu Junde;Long Tingting(Dept of Anatomy, School of Basic Medicine, Guizhou Medical University, Guiyang 550025)
机构地区:[1]贵州医科大学基础医学院人体解剖学教研室,贵阳550025
基 金:国家自然科学基金项目(编号:81660243);贵州省科技厅社会发展科技计划项目(编号:黔科合SY字[2015]3041号);贵州省科技厅与贵州医科大学联合项目(编号:黔科合LG字[2012]028号)
年 份:2019
卷 号:54
期 号:1
起止页码:44-49
语 种:中文
收录情况:BDHX、BDHX2017、CAS、CSA-PROQEUST、IC、JST、RCCSE、ZGKJHX、核心刊
摘 要:目的探讨小鼠海马神经干细胞(NSCs)的体外培养及Wnt/β-catenin信号通路激活剂Wnt3a对体外培养NSCs增殖和分化的影响,以期为脑血管与神经系统疾病的预防与治疗提供新的思路。方法通过无血清悬浮培养法获得新生24 h小鼠海马NSCs,光镜观察NSCs的形态变化,免疫化学染色法鉴定。将NSCs分为正常对照组(sham组),Wnt3a低剂量组(10μg/ml)、Wnt3a中剂量组(25μg/ml)和Wnt3a高剂量组(50μg/ml)。CCK-8法检测各组NSCs增殖活力;流式细胞仪检测各组NSCs的细胞周期; Western blot法检测各组中神经元特异烯醇化酶(NSE)与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化。结果成功分离、培养小鼠海马NSCs,光镜下呈典型细胞球,巢蛋白(Nestin)阳性。免疫荧光检测显示,NSCs经诱导分化为NSE和GFAP阳性细胞。CCK-8法检测表明,与sham组比较,随着Wnt3a浓度的增加,相应的培养组细胞在450 nm处吸光度值增加,NSCs的增殖活力增加,其促进作用呈剂量依赖性(P <0. 05)。流式细胞仪检测显示,与sham组比较,随着Wnt3a浓度的增加,相应的培养组细胞所处G1期比例降低,(S+G2)期比例升高,NSCs的增殖速率提高(P <0. 05)。Western blot显示,与sham组比较,Wnt3a低、中和高剂量组的NSE蛋白相对表达量提高(P <0. 05),而GFAP蛋白相对表达量降低(P <0. 05)。结论体外成功培养NSCs; Wnt3a激活Wnt/β-catenin信号通路可调控NSCs的增殖,促进其向神经元方向分化,抑制其向星形胶质细胞方向分化。
关 键 词:神经干细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路 WNT3A 增殖 分化
分 类 号:R329.2.1]
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