文献类型：期刊文章

作　　者：刘理静[1] 钱红[1] 胡柯[1] 张自珍[2] 贺兼斌[3]

LIU Li-jing;QIAN Hong;HU Ke;ZHANG Zi-zhen;HE Jian-bin(School of Medicine, Hunan University of Medicine, Huaihua Hunan 418000, China;School of Medicine,Hunan Polytechnic of Environment and Biology, Hengyang Hunan 421001, China;Dept of Respiration, the First People′s Hospital of Huaihua, Huaihua Hunan 418000, China)

机构地区：[1]湖南医药学院医学院,湖南怀化418000 [2]湖南环境生物职业技术学院医学院,湖南衡阳421001 [3]怀化市第一人民医院呼吸内科,湖南怀化418000

出　　处：《中国药理学通报》

基　　金：怀化市科技计划资助项目(No 2017G3305);湖南省教育厅优秀青年科研资助项目(No 14B142)

年　　份：2019

卷　　号：35

期　　号：2

起止页码：229-234

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、BIOSISPREVIEWS、CAS、CSCD、CSCD2019_2020、EMBASE、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、核心刊

摘　　要：目的探讨microRNA-27a-3p(miR-27a-3p)对肺成纤维细胞I型胶原(ColⅠ)和III型胶原(ColⅢ)合成的影响及分子机制。方法培养人胚肺成纤维细胞MRC-5,转染miR-27a-3p模拟物/抑制物,实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-27a-3p水平;qPCR和Western blot测定ColⅠ、ColⅢ、Wnt3a表达;Western blot分析细胞核内β-catenin水平。生物信息学预测miR-27a-3p与Wnt3a 3′-非翻译区(3′-UTR)靶向结合情况,并用双荧光素酶报告基因检测miR-27a-3p模拟物对Wnt3a 3′-UTR野生型和突变型荧光素酶活性的影响。给予Wnt3a/β-catenin信号通路抑制剂Dkk1预处理MRC-5细胞6 h,再用miR-27a-3p抑制物转染细胞48 h,qPCR和Western blot检测ColⅠ、ColⅢ表达。结果 miR-27a-3p模拟物明显增加miR-27a-3p水平,降低ColⅠ、ColⅢ、Wnt3a和β-catenin表达,其抑制物的作用则相反,与对照组比较,差异均有显著性(P<0.01)。Wnt3a 3′-UTR存在1个miR-27a-3p的结合位点,miR-27a-3p过表达减少野生型Wnt3a 3′-UTR荧光素酶活性(P<0.01),但对其突变型荧光素酶活性无影响(P>0.05)。Dkk1预处理几乎完全逆转miR-27a-3p抑制物对ColⅠ、ColⅢ合成的诱导作用(P<0.05)。结论 miR-27a-3p抑制肺成纤维细胞ColⅠ、ColⅢ生物合成,其机制与拮抗Wnt3a/β-catenin信号通路有关。

关 键 词：miR-27a-3p  WNT3A Β-CATENIN Ⅰ型胶原  Ⅲ型胶原  肺纤维化

分 类 号：R329.24] R342.2[基础医学类]