文献类型：期刊文章

作　　者：郭芳[1] 黄硕[1] 刘宁[1] 朱勇[1] 刘昌奎[1]

GUO Fang;HUANG Shuo;LIU Ning;ZHU Yong;LIU Changkui(Department of Oral and Maxillofacial Surgery,College of Stomatology,Xi'an Medical University,Xi'an 710021,China)

机构地区：[1]西安医学院口腔医学院口腔颌面外科学教研室,西安710021

出　　处：《山西医科大学学报》

基　　金：陕西省教育厅自然科学专项基金资助项目(18JK0672)

年　　份：2019

卷　　号：50

期　　号：2

起止页码：163-168

语　　种：中文

收录情况：CAS、JST、RCCSE、ZGKJHX、普通刊

摘　　要：目的探讨miR-195与RAF1的靶向关系及二者对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞生长、凋亡及迁移侵袭的调控。方法构建miR-195过表达载体并合成si-RAF1,转染入SCC-4细胞,以荧光实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-195及si-RAF1在SCC-4细胞中的转染效率。MTT法、克隆形成及细胞周期实验评价miR-195对SCC-4细胞生长的影响,流式细胞仪检测miR-195对SCC-4细胞凋亡的影响;并通过双荧光素酶报告基因系统、qRT-PCR及Western blot检测miR-195与RAF1的靶向关系。结果成功构建miR-195真核表达载体并合成si-RAF1,qRT-PCR显示miR-195真核表达载体及si-RAF1在SCC-4细胞中均具有较高的转染效率(P <0. 01)。miR-195的过表达能够显著抑制SCC-4细胞的增殖活性及克隆形成,诱导细胞周期G1/S的阻滞,并促进细胞凋亡的发生;同时双荧光素酶报告基因分析表明,miR-195过表达能够显著抑制RAF1野生型报告载体荧光活性; Western blot和qRT-PCR进一步证实了miR-195能够抑制RAF1的mRNA和蛋白的表达。结论 miR-195可能通过直接靶向RAF1来抑制OSCC细胞的生长及迁移侵袭,诱导细胞凋亡的发生。

关 键 词：口腔鳞状细胞癌 miR-195  RAF1  细胞增殖 凋亡 细胞周期

分 类 号：R739.8]