文献类型：期刊文章

作　　者：段欣强[1] 张洪亮[1] 周保琨[2] 杨瑞梅[1] 单虎[1]

DUAN Xin-qiang;ZHANG Hong-liang;ZHOU Bao-kun;YANG Rui-mei;SHAN Hu(College of Veterinary Medicine,Qingdao Agricultural University,Shandong Key Laboratory of Preventive Veterinary Medicine,Qingdao 266109,China;Animal Hasbandary and Veterinary Bureau of Jimo,Qingdao 266200,China)

机构地区：[1]青岛农业大学动物医学院山东省预防兽医学重点实验室,山东青岛266109 [2]山东省即墨区畜牧兽医局,山东青岛266200

出　　处：《中国兽医杂志》

基　　金：国家重点研发计划(2016YFD0501004);山东省高等学校优势学科人才团队培育计划;公益性行业(农业)科研专项(201303042)

年　　份：2018

卷　　号：54

期　　号：10

起止页码：7-10

语　　种：中文

收录情况：BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、RCCSE、核心刊

摘　　要：本研究旨在克隆犬细小病毒VP2(CPV-VP2)基因,构建乳酸菌重组表达载体,以乳酸菌表达CPV-VP2目的蛋白,通过重组目的蛋白检测及分析,为CPV乳酸菌口服疫苗研究提供支撑。以PCR方法扩增CPV-VP2编码目的基因,纯化后连接表达载体pMG36e,构建重组乳酸菌表达载体p MG36e-VP2,电转至乳酸球菌MG1363感受态,经PCR鉴定、双酶切鉴定及测序分析,挑选阳性重组菌株,命名为:pMG36e-VP2-MG1363。使用诱导剂Nisin诱导表达,SDS-PAGE和Western Blotting鉴定重组蛋白。结果显示,成功构建重组表达载体pMG36e-VP2,SDS-PAGE,结果表明,重组目的蛋白分子大小约65 kD,与理论值相符; Western Blotting结果表明,重组目的蛋白可被犬源CPV阳性血清所识别,具有良好免疫反应性。本研究用乳酸菌成功表达犬细小病毒蛋白,为该病新型疫苗的研究提供基础。

关 键 词：犬细小病毒 VP2 活乳酸菌载体  原核表达

分 类 号：S852.69]