文献类型：期刊文章

作　　者：廖妙容[1] 吴龙[1] 张爱玲[2] 钟玉宜[1] 温丽娟[1] 张豪[1] 袁晓龙[1] 李加琪[1] 张哲[1]

LIAO Miaorong;WU Long;ZHANG Ailing;ZHONG Yuyi;WEN Lijuan;ZHANG Hao;YUAN Xiaolong;LI Jiaqi;ZHANG Zhe(Guangdong Provincial Key Laboratory of Agro-animal Genomics and Molecular Breeding/College of Animal Science,South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China;Biology and Food Engineering Institute,Guangdong University of Education/Guangdong Development Center of Applied Ecologyand Ecological Engineering in Universities, Guangzhou 510303, China)

机构地区：[1]广东省农业基因组学与分子育种重点实验室/华南农业大学动物科学学院,广东广州510642 [2]广东第二师范学院生物与食品工程学院/广东高校应用生态工程技术开发中心,广东广州510303

出　　处：《华南农业大学学报》

基　　金：科技部科技基础工作专项(2014FY120800);国家现代农业产业技术体系项目(CARS-35);广东扬帆计划(2014YT02H042);广东省科技计划项目(2017A020208043)

年　　份：2019

卷　　号：40

期　　号：2

起止页码：31-39

语　　种：中文

收录情况：AJ、BDHX、BDHX2017、CAB、CAS、CSA、CSA-PROQEUST、CSCD、CSCD2019_2020、FSTA、IC、JST、RCCSE、SCOPUS、WOS、ZGKJHX、ZR、核心刊

摘　　要：【目的】获得猪LPAR3基因完整mRNA及基因结构,研究其启动子活性;探究LPAR3基因在子宫内膜的转录调控及可能影响母猪产仔的机制。【方法】应用5'RACE和3'RACE技术获取LPAR3基因完整mRNA序列;预测5'调控区潜在的启动子转录因子结合位点及CpG岛,构建不同长度的启动子双荧光素酶报告基因重组载体,与pRL-TK质粒共同转染至猪子宫内膜细胞,检测启动子活性;应用RT-qPCR比较LPAR3基因在妊娠第12天的二花脸猪和长大二元猪子宫内膜的相对表达量;应用亚硫酸氢钠修饰后测序比较LPAR3基因在妊娠第12天的二花脸猪和长大二元猪子宫内膜的甲基化状态。【结果】猪LPAR3 mRNA全长为2 127 bp,其中5'UTR和3'UTR的长度分别为202和860 bp,CDS区为1 065 bp。克隆获得包括LPAR3转录起始位点上游3 080 bp (–2 430/+650bp)的5'调控序列,分析预测显示该调控区不存在TATA box,存在GC元件、CPBP及糖皮质激素受体IR3等调控因子结合位点,且在–190/–84和–44/+651 bp处存在2个潜在CpG岛。成功构建9个不同长度的5'缺失报告重组载体并转染猪子宫内膜细胞。双荧光素酶活性检测结果显示,启动子P4(+454/+80 bp)的转录活性最高,其次是P6(–123/+80 bp)。RT-qPCR结果显示,妊娠第12天二花脸猪LPAR3基因在子宫内膜的表达量高于在其他组织的表达量,且极显著高于在妊娠第12天长大二元猪子宫内膜的表达量,LPAR3在2个猪种子宫内膜均处于低甲基化状态且差异不显著。【结论】猪LPAR3 mRNA全长为2 127 bp,妊娠第12天LAPR3基因在二花脸猪子宫内膜表达高于其在长大二元猪子宫内膜的表达,显示LPAR3可能参与了猪早期妊娠并影响产仔数。

关 键 词：猪  LPAR3基因  启动子 子宫内膜 妊娠 甲基化

分 类 号：S813.1]